Un guide des avantages et des inconvénients des microscopes à balayage laser multiphotoniques
1. Excitée par la lumière rouge ou infrarouge, la diffusion de la lumière est faible et la diffusion des petites particules est inversement proportionnelle à la quatrième puissance de la longueur d'onde.
2. Des photons plus dispersés à partir de la section efficace d'imagerie-peuvent être collectés sans avoir besoin de trous d'épingle.
3. Les sténopés ne peuvent pas distinguer les photons diffusés émis à partir de zones défocalisées ou focales, et les multiphotons ont un meilleur rapport signal-sur-bruit en imagerie profonde.
4. La lumière ultraviolette ou visible utilisée pour l'excitation d'un photon unique est facilement absorbée et atténuée par l'échantillon avant que le faisceau n'atteigne le plan focal, ce qui rend difficile l'excitation des couches profondes.
5. En termes d'observation en microscopie biologique, la première considération est de ne pas endommager l'état actif de l'organisme lui-même, de maintenir la circulation de l'eau, de la concentration en ions, de l'oxygène et des nutriments. Dans le domaine de l'observation de la lumière, l'énergie thermique et photonique doit rester dans la dose d'irradiation et l'énergie lumineuse qui n'endommagent pas les cellules.
6. La microscopie multiphotonique présente de nombreux avantages. En termes de résolution tridimensionnelle, d'invasion de profondeur, d'efficacité de diffusion, de lumière de fond, de rapport signal sur -bruit, de contrôle, etc., il existe des caractéristiques que les microscopes laser précédents ne possèdent pas ou ne peuvent pas surpasser.
Inconvénients du microscope à balayage laser multiphotonique :
1. Uniquement pour l’imagerie par fluorescence.
2. Si l'échantillon comprend des chromophores capables d'absorber la lumière d'excitation, l'échantillon peut être soumis à des dommages thermiques.
3. La résolution est légèrement réduite, bien qu'elle puisse être améliorée en utilisant simultanément de petits trous confocaux, il y a une perte de signal.
4. En raison des limites des lasers ultrarapides coûteux, le coût des microscopes à balayage multiphotoniques est relativement élevé.
