Avantages et inconvénients de la microscopie à balayage laser multiphoton
Les avantages sont les suivants:
1. Excité par la lumière rouge ou infrarouge, la diffusion de la lumière est petite (la diffusion des petites particules est inversement proportionnelle à la quatrième puissance de la longueur d'onde).
2. Pas besoin de trous d'épingle, capable de collecter des photons plus dispersés de la section transversale d'imagerie.
3. Les trous d'épingle ne peuvent pas distinguer les photons dispersés émis des zones défocus ou focales, et les multiphotons ont un meilleur rapport signal / bruit dans l'imagerie profonde.
4. La lumière ultraviolette ou visible utilisée pour l'excitation des photons unique est facilement absorbée et atténuée par l'échantillon avant que le faisceau n'atteigne le plan focal, ce qui rend difficile l'excitation des couches profondes.
5. En termes d'observation de la microscopie biologique, la première considération consiste à ne pas endommager l'état actif de l'organisme lui-même et à maintenir la circulation de l'eau, de la concentration en ions, de l'oxygène et des nutriments. Dans le domaine de l'observation de la lumière, l'énergie thermique et photonique doit rester dans la dose d'irradiation et l'énergie légère qui n'endommagent pas les cellules.
6. La microscopie multiphotonique présente également de nombreux avantages. En termes de résolution tridimensionnelle, d'invasion de profondeur, d'efficacité de diffusion, de lumière de fond, de rapport signal / bruit, contrôle, etc., les microscopes laser ont des caractéristiques inégalées ou supérieures que les microscopes laser précédents ne possédaient pas.
La microscopie multiphoton confocale à balayage laser a été étendue à divers domaines de recherche et d'application, il peut effectuer une observation non destructive tridimensionnelle sur les échantillons de leur état naturel et améliorer la résolution et le rapport signal / bruit du système en utilisant les modifications des propriétés des matériaux après l'excitation multiphoton On peut croire qu'avec le développement ultérieur de technologies mécaniques, matériaux et laser liées à la microscopie confocale multiphotonale, la microscopie à balayage laser confocal multiphoton aura un plus grand développement et des applications plus larges
Les inconvénients sont les suivants:
1. Seulement pour l'imagerie par fluorescence.
2. Si l'échantillon comprend des chromophores qui peuvent absorber la lumière d'excitation, comme les pigments, l'échantillon peut être soumis à des dommages thermiques.
3. La résolution est légèrement réduite, bien qu'elle puisse être améliorée en utilisant simultanément de petits trous confocaux, il y aura une perte de signal.
4. En raison des limites des lasers ultrarapides coûteux, le coût des microscopes à balayage multiphoton est relativement élevé.
