Comparaison entre la microscopie confocale et la microscopie optique conventionnelle
Le microscope est le principal outil d’observation des cellules. Selon les différentes sources lumineuses, il peut être divisé en deux catégories : les microscopes optiques et les microscopes électroniques. Le premier utilise la lumière visible (le microscope ultraviolet utilise la lumière ultraviolette) comme source de lumière, tandis que le second utilise un faisceau d'électrons comme source de lumière. Les microscopes optiques ordinaires et les microscopes confocaux laser appartiennent aux microscopes optiques.
Microscope optique ordinaire
Un microscope biologique commun se compose de trois parties, à savoir : ① un système d'éclairage, comprenant une source de lumière et un condenseur ; ② Le système d'amplification optique, composé d'un objectif et d'un oculaire, est le corps principal d'un microscope. Afin d'éliminer les aberrations sphériques et chromatiques, l'oculaire et l'objectif sont composés de groupes de lentilles complexes. Dispositif mécanique, utilisé pour fixer les matériaux et faciliter l'observation.
La clarté de l’image d’un microscope dépend non seulement de son grossissement, mais aussi de sa résolution. La résolution fait référence à la capacité d'un microscope (ou d'un œil humain situé à une distance de 25 cm de la cible) à distinguer des objets à petits intervalles. L'ampleur de la résolution dépend de la longueur d'onde de la lumière, de l'indice d'ouverture et de l'indice de réfraction du milieu. Il s'exprime par : R=0.61 λ/NANA=nsin /2, où n=l'indice de réfraction du milieu ; =angle d'ouverture (l'angle auquel l'échantillon ouvre l'ouverture de l'objectif), NA=ouverture numérique. Le coin du miroir est-il toujours inférieur à 180 ?, donc la valeur maximale de zui pour sina/2 doit être inférieure à 1.
L'indice de réfraction du verre utilisé dans la production de lentilles optiques est de 1.65-1.78, et plus l'indice de réfraction du milieu utilisé est proche de celui du verre, mieux c'est. Pour les objectifs secs, le milieu est l'air et le rapport d'ouverture est généralement de 0.05-0.95 ; La lentille à huile utilise de l'huile de cèdre comme support et le rapport d'ouverture peut être proche de 1,5.
La longueur d'onde de la lumière ordinaire est de {{0}} nm, donc la valeur de résolution du microscope ne sera pas inférieure à 0,2 μm et la résolution de l'œil humain est de 0,2 mm. Par conséquent, le grossissement maximum pour la conception d’un microscope est généralement de 1 000X.
