Couplage de l'AFM et de la microscopie optique inversée
La microscopie optique inversée couplée à l'imagerie AFM offre l'opportunité unique de combiner les données optiques (par exemple, les rapports relatifs ou les données de fluorescence) avec des images morphologiques haute résolution et des données mécaniques que seul un AFM peut fournir.
Grâce à la structure de conception du chemin optique ouvert du FlexAFM, la lumière peut traverser le FlexAFM pratiquement sans obstruction, et la conception optique spéciale SureAlign™ du support de bras en porte-à-faux SA facilite et simplifie l'utilisation du FlexAFM dans des environnements de test de liquides sans avoir besoin d'un laser. alignement. Couplé à l’option microscope à lumière inversée, le FlexAFM devient ainsi l’appareil idéal pour l’imagerie et la caractérisation des cellules en environnement physiologique. Dans cet exemple, des fibroblastes de rat -2 vivants ont été imagés.
Les applications du FlexAFM en association avec un microscope à lumière inversée ne se limitent certainement pas aux sciences de la vie. Les échantillons ci-dessous sont présentés, avec des échantillons de verre revêtu analysés à la fois par microscopie optique et par AFM. l'AFM fournit des données à plus haute résolution sur la zone observée et explique la nature des structures observées au microscope optique. Il peut également être utilisé pour déterminer l’épaisseur du revêtement.
Images de cellules PiD : (à gauche) Image de comparaison relative de la microscopie à lumière inversée via un appareil FlexAFM et une option de microscopie à lumière inversée, montrant des cellules fibroprogénitrices vivantes de Rat-2 et un bras suspendu AFM dans un milieu de culture cellulaire. (À droite) Image AFM de cellules placées sous le même appareil, montrant les détails du cytosquelette de rat -2, qui est facilement discernable à travers la membrane cellulaire de ces cellules. Taille de l'image AFM : 70 μm × 60 μm.
Rapport relatif entre le verre à revêtement (en haut) et l'image AFM (en bas). Au microscope optique, on observe des structures à texture similaire (par exemple, des intérieurs ovales) correspondant à des trous dans le revêtement, comme en témoignent les mesures AFM. Ils proposent une méthode ** pour déterminer l'épaisseur du revêtement, qui pour cet exemple est égale à 40 nm. Taille de l'image AFM : 90 μm × 35 μm.
