(Différences entre les microscopes à fluorescence (à deux photons, confocaux) et les microscopes ordinaires
Le microscope à fluorescence consiste à utiliser la lumière ultraviolette comme source de lumière, utilisée pour irradier l'objet à examiner, de sorte que l'objet émette une source de lumière, puis l'observation de l'objet est effectuée au microscope. Il est principalement utilisé pour les cellules d'immunofluorescence, qui se composent principalement d'une source de lumière, d'un système de plaque filtrante et d'un système optique pour observer l'image de fluorescence des échantillons grâce au grossissement de l'oculaire et de l'objectif. Regardons quel genre de différence le microscope à fluorescence et le microscope optique ordinaire ont.
1, en mode éclairage
L'éclairage du microscope à fluorescence est généralement du type tombant, c'est-à-dire que la source de lumière passe à travers l'objectif pour être placée sur l'échantillon à tester.
2, dans la résolution
Le microscope à fluorescence utilise la lumière ultraviolette comme source de lumière, la longueur d'onde est relativement courte, mais la résolution est supérieure à celle du microscope optique ordinaire.
3, la différence dans le filtre
Le microscope à fluorescence utilise deux filtres spéciaux, devant la source de lumière pour filtrer la lumière visible, entre l'objectif et l'oculaire pour filtrer la lumière ultraviolette, ce qui peut protéger l'œil humain.
Le microscope à fluorescence appartient également à une sorte de microscope optique, principalement la longueur d'onde d'excitation du microscope à fluorescence est courte, ce qui a conduit à la construction de structures diverses du microscope à fluorescence et du microscope ordinaire et à l'utilisation de différents microscopes à fluorescence qui ont pour la plupart une bonne capture de la fonction de lumière faible, donc dans la fluorescence extrêmement faible, sa capacité d'imagerie et bonne. Couplé à l'amélioration continue du microscope à fluorescence ces dernières années, le bruit est également considérablement réduit. Par conséquent, de plus en plus de microscopes à fluorescence ont été utilisés.
Le microscope à fluorescence biphotonique présente de nombreux avantages :
(1) Les longueurs d’onde de lumière plus longues sont moins affectées par la diffusion que les longueurs d’onde de lumière plus courtes pénètrent facilement dans l’échantillon ;
(2) Les molécules fluorescentes en dehors du plan focal ne sont pas excitées, de sorte qu'une plus grande quantité de lumière d'excitation puisse atteindre le plan focal, de sorte que la lumière d'excitation puisse pénétrer plus profondément dans l'échantillon ;
3) Les longueurs d’onde plus longues de la lumière proche infrarouge sont moins toxiques pour les cellules que les longueurs d’onde plus courtes ;
4) Lors de l'utilisation d'un microscope à deux photons pour observer un spécimen, le photoblanchiment et la phototoxicité ne sont présents qu'au plan focal. Par conséquent, les microscopes à deux photons sont plus adaptés que les microscopes à photon unique pour observer des spécimens épais, pour observer des cellules vivantes ou pour mener des expériences de photoblanchiment ponctuel.
