Méthode de comptage direct des microscopes microbiens
L’utilisation d’un hémocytomètre pour compter directement les micro-organismes au microscope est une méthode couramment utilisée pour le comptage microbien. L’avantage de cette méthode est son intuitivité et sa rapidité. Placer la suspension bactérienne convenablement diluée (ou suspension de spores) dans la chambre de comptage entre la lame d'hémocytomètre et la lame de couverture, et compter au microscope. Grâce au volume constant de la salle de comptage (0,1 mm2), le nombre total de micro-organismes par unité de volume peut être converti en fonction du nombre de micro-organismes observés au microscope. Étant donné que cette méthode calcule la somme des cellules bactériennes vivantes et mortes, elle est également connue sous le nom de méthode de comptage bactérien total.
Une plaque de comptage de cellules sanguines est généralement une lame de verre spécialement conçue avec quatre rainures formant trois plates-formes. La plate-forme centrale est divisée en deux par une courte rainure horizontale et chaque côté de la plate-forme est gravé d'une grille. Chaque grille est divisée en neuf grands carrés, et le grand carré au milieu est la salle de comptage, où est effectué le comptage microbien.
Il existe généralement deux spécifications concernant l'échelle de la salle de comptage. La première est qu'un grand carré est divisé en 16 carrés du milieu, et chaque carré du milieu est ensuite divisé en 25 petits carrés (Figure VIII-2) ; Une autre méthode consiste à diviser un grand carré en 25 carrés du milieu, et chaque carré du milieu est ensuite divisé en 16 petits carrés (Figure VIII-1, C). Mais quelle que soit la taille du tableau de comptage, le nombre de petits carrés dans chaque grand carré est le même, soit 16 × 25=400 petits carrés.
Si la longueur du côté de chaque grand carré est de 1 mm, l’aire de chaque grand carré est de 1 mm2. Après recouvrement avec un couvre-objet, la hauteur entre la lame et le couvre-objet est de 0,1 mm, donc le volume de la salle de comptage est de 0,1 mm3.
Lors du comptage, le nombre total de bactéries dans cinq carrés est généralement compté, puis la valeur moyenne de chaque carré est obtenue. En le multipliant par 16 ou 25, vous obtenez le nombre total de bactéries dans un grand carré, qui est ensuite converti en nombre total de bactéries dans 1 ml de solution bactérienne.
