Avez-vous déjà compris les principes de base de la microscopie à contraste de phase ?
Le microscope à contraste de phase a été inventé par le scientifique hollandais Zernike en 1935 pour observer des spécimens non colorés. Pour les cellules vivantes et les spécimens biologiques non colorés, en raison de la différence d'indice de réfraction et d'épaisseur de la microstructure de chaque partie de la cellule, lors du passage de l'onde lumineuse, la longueur d'onde et l'amplitude ne changent pas, seule la phase change (différence d'amplitude ), qui est invisible à l'œil humain. observer. Le microscope à contraste de phase modifie la différence de phase et utilise des phénomènes de diffraction et d'interférence de la lumière pour transformer la différence de phase en une différence d'amplitude pour observer les cellules vivantes et les spécimens non colorés. La différence entre un microscope à contraste de phase et un microscope ordinaire est qu'un diaphragme annulaire est utilisé à la place d'un diaphragme variable, une lentille d'objectif avec une plaque de phase est utilisée à la place d'une lentille d'objectif ordinaire et un télescope pour la coaxialité est fourni.
Principes de base de la microscopie à contraste de phase :
En utilisant la différence d'indice de réfraction et d'épaisseur entre les différents composants structurels de l'objet, la différence de chemin optique traversant différentes parties de l'objet est convertie en différence d'amplitude (intensité lumineuse), et à travers la lentille du condenseur avec un diaphragme annulaire et le différence de phase avec une lame de phase L'objectif réalise le microscope d'observation. Il est principalement utilisé pour observer des cellules vivantes ou des coupes de tissus non colorés, et parfois il peut également être utilisé pour observer des échantillons colorés qui manquent de contraste.
La différence de chemin optique de la lumière visible traversant l'échantillon est transformée en une différence d'amplitude, améliorant ainsi le contraste entre diverses structures et rendant diverses structures clairement visibles. La lumière est réfractée après avoir traversé l'échantillon, s'écarte du chemin optique d'origine et est retardée de 1/4 λ (longueur d'onde). S'il est augmenté ou diminué de 1/4λ, la différence de chemin optique devient 1/2λ et les deux faisceaux interfèrent après l'axe de la lumière Renforcer, augmenter ou diminuer l'amplitude, améliorer le contraste.
Le microscope à contraste de phase a deux fonctions que les autres microscopes n'ont pas : ① il sépare la lumière directe (lumière de fond dans le champ de vision) de la lumière diffractée par l'objet ; ② il supprime environ la moitié de la longueur d'onde de la phase afin qu'elle ne puisse pas interagir, ce qui entraîne un changement d'intensité.
