Comment choisir un microscope à fluorescence approprié
Le microscope à fluorescence est un équipement d'imagerie microscopique standard dans les laboratoires et les départements de pathologie, qui utilise les caractéristiques de fluorescence pour l'observation et l'imagerie. Il est largement utilisé dans divers domaines tels que la biologie cellulaire, la neurobiologie, la botanique, la microbiologie, la pathologie, la génétique, etc.
Sélection de la source de lumière fluorescente
Les sources de lumière fluorescente couramment utilisées comprennent actuellement des lampes au mercure, des lampes à halogénures métalliques et les sources de lumière LED en développement rapide ces dernières années. Le spectre des sources de lumière fluorescente peut être continue ou discontinue, et l'énergie varie dans différentes bandes. Les sources de lumière LED deviennent progressivement la principale source de lumière des microscopes à fluorescence en raison de leurs bandes spectrales relativement étroites, de leur débit d'énergie plus stable, de leur durée de vie plus longue et de leur plus grande sécurité et convivialité environnementale.
Microscope confocal
Dans l'observation de microscopie à fluorescence traditionnelle, en raison du chevauchement des substances de marquage fluorescentes et des structures de fluorescence spontanées, elles sont étroitement liées ensemble. Cependant, les objectifs traditionnels de microscopie à épifluorescence collectent non seulement la lumière du plan focal, mais collectent également la lumière diffusée au-dessus et en dessous du plan focal, entraînant une résolution et un contraste d'image considérablement réduits.
L'imagerie confocale ne détecte que la partie de la lumière réfléchie du plan focal, résolvant ainsi le problème ci-dessus. La source de lumière forme un petit et fin sur le plan focal à travers un trou d'épingle, et la lumière émise par le plan focal est collectée par la lentille objective. La majorité de la fluorescence émise par des points au-dessus ou en dessous du plan focal de la lentille objective ne peut pas converger vers le trou d'épingle. Seule la fluorescence située sur le plan focal et une petite partie de la fluorescence défocus peuvent passer à travers le trou d'épingle, tandis que le faisceau lumineux à l'extérieur du plan focal converge à l'avant ou derrière la plaque de trou de la forme et est empêchée d'entrer dans le détecteur à travers le trou d'épingle. L'image détectée est l'image du plan focal, de sorte que la qualité d'image finale est considérablement améliorée.
En raison des divers avantages et de la pratique de la microscopie confocale à balayage laser, la microscopie confocale est actuellement un assistant expérimental indispensable dans les domaines de haute précision de la biologie cellulaire, de la botanique et de la recherche cellulaire. Dans le même temps, dans les futurs centres de recherche scientifique, ce sera l'outil de recherche le plus fondamental et le plus fondamental.
