Introduction au choix entre les microscopes inversés et les microscopes à fluorescence
Le microscope est un instrument important dans la culture cellulaire et les expériences dérivées associées. Il existe actuellement différents types de microscopes sur le marché et choisir un microscope qui répond aux besoins et qui soit adapté constitue un défi. Ci-dessous, nous présenterons les principes des microscopes inversés et des microscopes à fluorescence pour une sélection facile.
La composition d'un microscope inversé est la même que celle d'un microscope ordinaire, composé principalement de trois parties : la partie mécanique, la partie d'éclairage et la partie optique. La composition d'un microscope inversé est la même que celle d'un microscope droit ordinaire, sauf que l'objectif et le système d'éclairage sont inversés, le premier étant situé sous la platine et le second au-dessus de la platine. Cette structure permet d'augmenter considérablement la distance effective entre le système de focalisation de l'éclairage et la scène, facilitant ainsi le placement d'instruments d'observation plus épais tels que des boîtes de culture et des bouteilles de culture cellulaire (bien entendu, les lames de verre sont également acceptables), tandis que la distance de travail entre l'objectif et le matériau n'a pas besoin d'être très grande. Le microscope inversé est utilisé par les institutions médicales et sanitaires, les universités et les instituts de recherche pour observer les micro-organismes, les cellules, les bactéries, la culture tissulaire, les suspensions, les sédiments, etc. Il peut observer en continu le processus de reproduction et de division cellulaire et bactérienne dans le milieu de culture, et peut capturer n'importe quel état au cours de ce processus. Largement utilisé dans des domaines tels que la cytologie, la parasitologie, l'oncologie, l'immunologie, le génie génétique, la microbiologie industrielle, la botanique, etc.
La microscopie à fluorescence est utilisée pour étudier l'absorption, le transport, la distribution et la localisation de substances dans les cellules. Pour l'objet testé, il existe deux manières de générer de la fluorescence : la fluorescence spontanée, qui émet directement de la fluorescence après irradiation UV ; La fluorescence secondaire se produit lorsque l'objet observé est traité avec des colorants fluorescents puis irradié avec de la lumière ultraviolette pour émettre une fluorescence. Certaines substances présentes dans les cellules, comme la chlorophylle, produisent une fluorescence spontanée lorsqu'elles sont exposées au rayonnement ultraviolet ; Certaines substances elles-mêmes ne peuvent pas émettre de fluorescence, mais si elles sont colorées avec des colorants fluorescents ou des anticorps fluorescents, elles peuvent également émettre une fluorescence secondaire après avoir été irradiées par de la lumière ultraviolette. Le microscope à fluorescence utilise une source de lumière ponctuelle très efficace pour émettre une certaine longueur d'onde de lumière (lumière ultraviolette 365 nm ou lumière bleue violette 420 nm) à travers un système de filtre couleur comme lumière d'excitation, qui excite les substances fluorescentes à l'intérieur de l'échantillon pour émettre diverses couleurs de fluorescence, puis observe à travers le grossissement de l'objectif et de l'oculaire. De cette façon, même avec une faible fluorescence dans un fond fort, il est facile à reconnaître et présente une sensibilité élevée. Il est principalement utilisé pour l’étude de la structure, de la fonction et de la composition chimique des cellules.
