Introduction aux avantages et inconvénients de la microscopie à balayage laser multi-photon
1. Excité par la lumière rouge ou infrarouge, la diffusion de la lumière est petite et la diffusion de petites particules est inversement proportionnelle à la quatrième puissance de la longueur d'onde.
2. Des photons plus dispersés de la section transversale d'imagerie peuvent être collectés sans avoir besoin de trous d'épingle.
3. Les trous d'épingle ne peuvent pas distinguer les photons dispersés émis des zones défocus ou focales, et les multiphotons ont un meilleur rapport signal / bruit dans l'imagerie profonde.
4. La lumière ultraviolette ou visible utilisée pour l'excitation des photons unique est facilement absorbée et atténuée par l'échantillon avant que le faisceau n'atteigne le plan focal, ce qui rend difficile l'excitation des couches profondes.
5. En termes d'observation de la microscopie biologique, la première considération consiste à ne pas endommager l'état actif de l'organisme lui-même, maintenir la circulation de l'eau, de la concentration en ions, de l'oxygène et des nutriments. Dans le domaine de l'observation de la lumière, l'énergie thermique et photonique doit rester dans la dose d'irradiation et l'énergie légère qui n'endommagent pas les cellules.
6. La microscopie multiphotonique présente de nombreux avantages. En termes de résolution tridimensionnelle, d'invasion de profondeur, d'efficacité de diffusion, de lumière de fond, de rapport signal / bruit, contrôle, etc., il existe des caractéristiques que les microscopes laser précédents ne possèdent pas ou ne peuvent pas dépasser
Inconvénients du microscope à balayage laser multiphotonal:
1. Seulement pour l'imagerie par fluorescence.
2. Si l'échantillon comprend des chromophores qui peuvent absorber la lumière d'excitation, l'échantillon peut être soumis à des dommages thermiques.
3. La résolution est légèrement réduite, bien qu'elle puisse être améliorée en utilisant simultanément de petits trous confocaux, il y a une perte de signal.
4. En raison des limites des lasers ultrarapides coûteux, le coût des microscopes à balayage multiphoton est relativement élevé.
