Méthodes de préparation d'échantillons pour la microscopie optique et électronique des films
La méthode de microfilmage comprend généralement quatre catégories : méthode de sectionnement, méthode de scellement global, méthode de revêtement et méthode de pressage.
①Méthode de tranche. Épaisseur de tranche de microscope optique entre 2 et 25 microns, matières végétales et animales générales, la tranche a une épaisseur d'environ 10 microns est appropriée. La méthode de sectionnement varie selon les différents agents d'enrobage. La méthode de coupe à la paraffine, la méthode de coupe à la colle de coton, la méthode de coupe congelée et la méthode au méthacrylate de glycol (appelée méthode GMA) sont couramment utilisées. La méthode de coupe en paraffine comprend les étapes de fixation, d’inclusion, de coupe, de coloration, de déshydratation et de scellement. La clé est d’incorporer le biomatériau dans de la cire de paraffine et d’utiliser la cire de paraffine comme support pour couper le biomatériau immergé dans le bloc de cire en fines tranches idéales. Le processus opératoire est le suivant : fixation → lavage à l'eau → étape par étape de la déshydratation à l'alcool à faible concentration à haute concentration → transparence du xylène → immersion dans la cire → enrobage → sectionnement → rapiéçage → déparaffinage au xylène → étape par étape de la concentration élevée à la faible concentration traitement à l'alcool, et enfin transition vers l'eau → coloration → étape par étape de la déshydratation de l'alcool à faible concentration à haute concentration → transparence du xylène → scellement avec un adhésif à base de résine. Les étapes de base impliquées sont les mêmes dans toutes sortes de techniques de réalisation cinématographique.
② Méthode d'étanchéité intégrale. Utilisé pour les cellules individuelles, les organismes minuscules ou les organes dispersés de la méthode du film entier monté. Cette méthode nécessite également diverses étapes de fixation, coloration, déshydratation, transparence et scellement. Cette méthode est utilisée pour la préparation des pièces buccales des chrysopes et des insectes.
Méthode de frottis. Méthode de préparation dans laquelle un échantillon biologique facilement dispersé est déposé sur une lame. Le frottis sanguin en est un exemple.
④Méthode de pressage. Les tissus naturels facilement dispersés ou les tissus facilement dispersés après traitement, tels que les spermatocytes animaux, les cellules de l'extrémité des racines, etc. sur la lame, plus une lamelle, puis écrasent avec force les tissus, de sorte que les cellules ou les structures intracellulaires se propagent en une couche des méthodes de tournage. La méthode de presse est souvent utilisée pour observer les chromosomes, généralement colorés à l'acétate de magenta, au rouge lichen et au rouge acide carbolique.
