Microscopie - Structure Fonction Description
objectif
La lentille d'objectif est la partie optique du microscope pour la première imagerie, qui est composée de plusieurs groupes de lentilles collées ensemble. La distance focale est la distance focale totale du groupe de lentilles.
Selon le degré de correction des aberrations chromatiques, des aberrations, de la courbure de champ, etc., et de leurs caractéristiques propriétaires, il existe plusieurs types d'objectifs : objectifs (plan) achromatiques, objectifs (plan) apochromatiques, objectifs super-plan et spécialisés, etc. .
Aberration chromatique : la différence de couleur dans l'imagerie des sources de lumière visible (lumière polychromatique). Un point objet blanc ne peut pas former un point image blanc, mais une tache image colorée.
Aberration : la tache diffuse (cercle de confusion) formée au niveau du plan image après la réfraction du faisceau lumineux émis par le point objet hors de l'axe optique par le système optique.
Aberration de coma : erreur d'imagerie asymétrique de type comète après que le faisceau lumineux émis par un point objet en dehors de l'axe optique est réfracté par le système optique.
Lentille d'objectif achromatique objectif achromatique : lentille d'objectif ordinaire, marquée "Ach" sur la coque. Corrigez principalement l'aberration chromatique (rouge, bleu), l'aberration sphérique (jaune, vert) et le coma de l'imagerie de l'axe optique. La courbure de champ est grande.
Lentille d'objectif apochromatique objectif apochromatique: lentille d'objectif de haute qualité avec une structure précise et complexe, en verre spécial tel que la fluorite, et marquée "Apo" sur la coque. Sur la base de la lentille d'objectif achromatique, il doit également corriger le spectre secondaire, l'aberration rouge, verte et bleue et l'aberration sphérique rouge et bleue. L'objectif apochromatique a une correction parfaite des aberrations, une plus grande ouverture numérique, une résolution plus élevée, un grossissement efficace plus élevé et une qualité d'image supérieure.
Lentille d'objectif semi-apochromatique : le coût de performance et la qualité d'image se situent entre la lentille d'objectif achromatique et la lentille d'objectif apochromatique, également connue sous le nom de lentille d'objectif en spath fluor (fluorite), marquée par "FL". L'aberration chromatique et l'aberration sphérique du rouge et du bleu peuvent être corrigées.
Objectif du plan : il corrige principalement les défauts de courbure du champ, de sorte que le champ de vision soit plat, l'imagerie réaliste et l'observation pratique. Il s'agit d'une lentille arrière semi-circulaire ajoutée à l'ensemble de lentille d'objectif. Il peut également être combiné dans des objectifs achromatiques, des objectifs apochromatiques.
Lentille d'objectif spéciale : sur la base de la lentille d'objectif ci-dessus, la lentille d'objectif est conçue et fabriquée pour obtenir un effet d'observation spécial.
oculaire
L'oculaire grossit l'image réelle de l'objectif, qui est le grossissement de l'image intermédiaire et appartient au second grossissement. La structure de l'oculaire est relativement simple, composée de plusieurs lentilles en plusieurs groupes. Le point où les rayons lumineux traversant l'oculaire se croisent au-dessus est appelé le point de l'œil, qui est la meilleure position pour l'observation par imagerie.
L'oculaire a une variété de configurations de grossissement, 10X est le plus couramment utilisé ; 5X a une réductibilité d'image plus élevée, mais le grossissement est relativement faible ; L'oculaire 20X a le plus grand grossissement, mais la clarté de l'image est réduite. Il doit être sélectionné en fonction des besoins réels.
Condenseur
Le condenseur est utilisé pour compenser le manque de lumière, modifier de manière appropriée les propriétés lumineuses de la source lumineuse, focaliser l'échantillon et améliorer l'éclairage. Il est situé sous la platine et doit coopérer avec elle lors de l'utilisation d'un objectif NA supérieur ou égal à 0.40. Il a une variété de structures et différentes ouvertures numériques de l'objectif ont des exigences différentes pour le condenseur.
1. Condenseur Abbe (condenseur Abbe): Le condenseur Abbe est composé de deux lentilles, qui ont une meilleure capacité de collecte de lumière. Lorsque l'ouverture numérique de l'objectif du microscope ordinaire est supérieure ou égale à 0.60, la correction de l'aberration chromatique et de l'aberration sphérique n'est pas complète et doit être utilisée ensemble.
2. Condenseur aplanatique achromatique : Le condenseur achromatique est composé d'une série de lentilles, qui peuvent corriger l'aberration chromatique et l'aberration sphérique pour obtenir une imagerie satisfaisante. C'est le meilleur pour l'observation en champ clair. Il est équipé d'un microscope avancé et d'un objectif à faible grossissement non applicable.
3. Les autres condenseurs font référence aux condenseurs utilisés à des fins autres que le champ clair mentionné ci-dessus, tels que les condenseurs à fond noir, les condenseurs à contraste de phase, les condenseurs polarisants, les condenseurs à interférence différentielle, etc.
méthode d'éclairage
Les méthodes d'éclairage du microscope sont divisées en deux catégories : l'éclairage transmis et l'épi-éclairage selon la position de la source lumineuse et la direction du faisceau.
1. Éclairage transmis (éclairage transparent) L'éclairage transmis convient aux échantillons transparents ou translucides, et la plupart des microscopes biologiques appartiennent à ce type d'éclairage. Parmi eux, il existe deux formes d'éclairage central et d'éclairage oblique.
(1) L'éclairage central signifie que l'axe central du faisceau d'éclairage et l'axe optique du microscope sont sur la même ligne droite, ce qui est la méthode d'éclairage transmissif la plus couramment utilisée. Cette méthode est divisée en éclairage critique et éclairage Kohler.
1) Éclairage critique, méthode d'éclairage général. Avantages : Le faisceau de la source lumineuse est imagé par le condenseur et irradié sur l'échantillon, et le faisceau est étroit et puissant. Défauts : l'image du filament de la source lumineuse coïncide avec le plan de l'échantillon, l'éclairage d'imagerie est inégal et il existe une différence entre la lumière et l'obscurité. Élimination : placez un filtre de couleur blanc laiteux absorbant la chaleur devant la source lumineuse pour rendre l'éclairage plus uniforme, ou remplacez la source lumineuse LED.
2) L'éclairage Kohler, nommé en l'honneur de "l'imagerie secondaire" inventée par les ingénieurs de Zeiss. Il surmonte le défaut d'éclairage critique, a un bon effet d'imagerie et une bonne photomicrographie. Les principales caractéristiques sont les suivantes : après que le filament de la source lumineuse a traversé le condenseur et le diaphragme à champ de vision variable, l'image du filament tombe sur le plan de l'ouverture du condenseur pour la première fois, et le condenseur forme une deuxième image de filament au plan de mise au point arrière là-bas. Le foyer thermique n'est plus sur le plan de l'échantillon, et l'échantillon peut être observé avec un éclairage à long terme.
(2) éclairage oblique (éclairage oblique), l'axe central du faisceau ne coïncide pas avec l'axe optique du microscope et l'échantillon est éclairé obliquement à un certain angle. Il est couramment utilisé dans les microscopes à contraste de phase, à fond noir et stéréoscopiques.
2. Éclairage incident : L'éclairage incident est également appelé éclairage réfléchissant. La source lumineuse est au-dessus de l'échantillon et le faisceau lumineux tombe sur l'échantillon après avoir traversé l'objectif. L'objectif agit comme un condenseur et convient aux échantillons non transparents. Les microscopes à fluorescence, stéréoscopiques, inversés et confocaux utilisent cet éclairage.
Réglage de l'axe optique
Dans le système optique du microscope, l'axe optique de la source lumineuse, de la lentille du condenseur, de l'objectif et de l'oculaire et le centre du diaphragme doivent coïncider avec l'axe optique du microscope, et le réglage de l'axe optique avant utilisation ne peut être ignoré .
1. Réglage du centre du condenseur Le réglage du centre du condenseur est au centre du réglage de l'axe optique du microscope. Méthode : réduisez d'abord le diaphragme de champ et observez avec un objectif 10×. Si l'image de contour du diaphragme n'est pas au centre, ajustez les deux vis à l'extérieur du condenseur pour l'ajuster au centre ; puis augmentez lentement le diaphragme de champ jusqu'à ce que l'image de contour soit alignée avec le centre. Les bords du champ de vision coïncident, indiquant qu'ils sont déjà coaxiaux, et il est préférable d'en utiliser un légèrement plus grand.
2. Réglage du diaphragme d'ouverture Le diaphragme d'ouverture est installé dans le condenseur. Il y a des marques d'échelle sur le bord extérieur du condenseur du microscope de recherche, ce qui est pratique pour ajuster le condenseur en fonction de l'ouverture numérique de l'objectif. Il doit être ajusté de manière synchrone lors du remplacement de l'objectif.
