Méthodes de préparation des échantillons en microscopie optique et électronique
Les méthodes de préparation microscopique comprennent généralement quatre catégories : méthode de coupe, méthode de montage entier, méthode de frottis et méthode de fabrication de comprimés.
①Méthode de découpage. L'épaisseur des tranches d'un microscope optique est comprise entre 2 et 25 microns. Généralement, une épaisseur de tranche d'environ 10 microns pour les matières animales et végétales est appropriée. Les méthodes de sectionnement varient en fonction du support d'enrobage. La méthode de coupe en paraffine, la méthode de coupe en colloïde de coton, la méthode de coupe congelée et la méthode au méthacrylate d'éthylène glycol (appelée méthode GMA) sont couramment utilisées. La méthode de coupe en paraffine comprend des étapes telles que la fixation, l’inclusion, la coupe, la coloration, la déshydratation et le montage. La clé est d'incorporer le matériel biologique dans la paraffine, d'utiliser la paraffine comme support et de couper le matériel biologique immergé dans le bloc de cire en fines tranches idéales. Le processus opérationnel est le suivant : fixation → lavage à l'eau → déshydratation de l'alcool étape par étape de faible concentration à concentration élevée → transparence du xylène → trempage de cire → intégration → sectionnement → patch → déparaffinage au xylène → traitement à l'alcool étape par étape de haute concentration à faible concentration. Enfin, il passe à l'eau → teinture → déshydratation par étapes d'une faible concentration à une concentration élevée d'alcool → transparence du xylène → scellement par colle de résine. Les étapes de base sont les mêmes dans toutes les techniques de production.
②Méthode d'étanchéité intégrale. Méthode de préparation complète pour cellules individuelles, organismes minuscules ou organes dispersés. Cette méthode nécessite également différentes étapes de fixation, coloration, déshydratation, transparence et montage. Cette méthode est utilisée pour préparer les paramécies et les pièces buccales des insectes.
③Méthode de frottis. Méthode de préparation dans laquelle des échantillons biologiques facilement dispersés sont étalés sur une lame de verre. Un frottis sanguin en est un exemple.
④Méthode de pressage des comprimés. Placez des tissus naturels et facilement dispersés ou des tissus qui se dispersent facilement après le traitement, tels que des spermatocytes animaux et des cellules de l'extrémité des racines, sur une lame de verre, ajoutez une lamelle et écrasez le tissu avec force pour former les cellules ou les cellules à l'intérieur. répartis en une seule couche de méthode de production. La méthode de pressage est souvent utilisée pour observer les chromosomes, généralement colorés à l'acétate de magenta, au rouge lichen et à la fuchsine carbolique.
