Principes et caractéristiques structurelles du microscope à fluorescence
Le microscope à fluorescence utilise une source de lumière ponctuelle très efficace pour émettre une certaine longueur d'onde de lumière (telle que Ultraviolet Light 3650 ou Purple Blue Light 4200) à travers un système de filtre de couleur comme lumière d'excitation, qui excite les substances fluorescentes dans l'échantillon pour émettre diverses couleurs de fluorescence, puis observe par la magistance de l'objectif objectif et de l'oeuf. De cette façon, même avec une fluorescence faible dans un fond fort, il est facile à reconnaître et a une sensibilité élevée. Il est principalement utilisé pour l'étude de la structure cellulaire, de la fonction et de la composition chimique. La structure de base d'un microscope à fluorescence est composée d'un microscope optique ordinaire et de certains accessoires tels qu'une source de lumière fluorescente, un filtre d'excitation, un séparateur de faisceau à double couleur et un filtre de blocage. Source de lumière fluorescente - utilise généralement des lampes à mercure à ultra-haute pression (50-200 W), qui peuvent émettre de la lumière de différentes longueurs d'onde, mais chaque substance fluorescente a une longueur d'onde de lumière d'excitation qui produit une fluorescence forte. Par conséquent, les filtres d'excitation (généralement des filtres à excitation ultraviolet, violet, bleu et vert) doivent être ajoutés pour ne permettre qu'une certaine longueur d'onde de lumière d'excitation pour passer et irradier l'échantillon, tout en absorbant toutes les autres lumière. Après avoir été irradiée avec une lumière d'excitation, chaque substance émet une fluorescence visible avec une longueur d'onde plus longue que la longueur d'onde d'irradiation en très peu de temps. La fluorescence a une spécificité et est généralement plus faible que la lumière d'excitation. Afin d'observer une fluorescence spécifique, un filtre de blocage (ou de suppression) doit être ajouté derrière l'objectif. Ses fonctions sont doubles: d'abord, absorber et bloquer la lumière d'excitation de pénétrer dans l'oculaire pour éviter de perturber la fluorescence et d'endommager les yeux; Deuxièmement, pour sélectionner et permettre à la fluorescence spécifique de passer, présentant une couleur fluorescente spécifique. Deux types de filtres doivent être utilisés en combinaison.
