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Principes de microscopie confocale et terrain

Jan 04, 2024

Principes de microscopie confocale et terrain

 

1, le microscope confocal dans la lumière réfléchie sur le chemin optique plus une demi-lentille semi-réfléchissante, aura traversé la lentille de la lumière réfléchie pliée dans l'autre sens, au foyer d'un déflecteur avec un sténopé, le trou est situé au point focal, le déflecteur est un tube photomultiplicateur derrière. On peut imaginer que la lumière réfléchie avant et après le point focal de la lumière du détecteur à travers cet ensemble de système confocal, ne pourra pas se concentrer sur le petit trou, sera bloquée par le déflecteur. Le photomètre mesure donc l'intensité de la lumière réfléchie au point focal.


2, principe : le microscope optique traditionnel utilise une source de lumière de champ, l'image de chaque point de l'échantillon sera perturbée par la diffraction ou la diffusion de la lumière des points voisins ; Le microscope confocal à balayage laser utilise un faisceau laser à travers le trou d'épingle éclairant pour former une source ponctuelle de lumière sur l'échantillon dans le plan focal du balayage de chaque point de l'échantillon, l'échantillon est irradié, lors de la détection du trou d'épingle lors de l'imagerie. , par la détection du sténopé après le tube photomultiplicateur (PMT) ou le dispositif d'électrocouplage à froid (cCCD) point par point ou point par point ou point par point, l'intensité lumineuse est mesurée par un photomètre. cCCD) reçoit point par point ou ligne par ligne et forme rapidement une image fluorescente sur l'écran de l'ordinateur. Le sténopé d'éclairage et le sténopé de détection sont conjugués par rapport au plan focal de l'objectif, le point sur le plan focal est focalisé sur le sténopé d'éclairage et le sténopé d'émission en même temps, et le point en dehors du plan focal ne sera pas imagée au niveau du trou d'épingle de détection, de sorte que l'image confocale soit une coupe transversale optique de l'échantillon, ce qui surmonte les inconvénients de l'image floue du microscope ordinaire.


3, domaines d'application : médecine, recherche animale et végétale, biochimie, bactériologie, biologie cellulaire, embryon tissulaire, science alimentaire, génétique, pharmacologie, physiologie, optique, pathologie, botanique, neurosciences, biologie marine, science des matériaux, science électronique, mécanique, géologie pétrolière, minéralogie.

 

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