Méthodes de traitement des échantillons et étapes pour la microscopie électronique
Avant d’utiliser un microscope électronique à transmission pour observer des échantillons biologiques, ceux-ci doivent être prétraités. Les scientifiques utilisent différentes méthodes de traitement selon les exigences de la recherche.
Fixation : Afin de préserver au maximum l'échantillon, du glutaraldéhyde est utilisé pour durcir l'échantillon et de l'acide osmique est utilisé pour colorer la graisse.
Fixation à froid : l'échantillon est rapidement congelé dans de l'éthane liquide afin que l'eau ne cristallise pas et forme de la glace amorphe. Les échantillons ainsi conservés subissent moins de dégâts, mais le contraste de l’image est très faible.
Déshydratation : utilisez de l'éthanol et de l'acétone pour remplacer l'eau.
Rembourré : L'échantillon peut être divisé après avoir été rembourré.
Segmentation : L'échantillon est découpé en fines tranches à l'aide d'une lame diamantée.
Coloration : les atomes lourds tels que le plomb ou l'uranium diffusent les électrons plus fortement que les atomes plus légers et peuvent donc être utilisés pour augmenter le contraste.
Avant d'utiliser un microscope électronique à transmission pour observer des métaux, l'échantillon doit être
Virus au microscope électronique
Couper en tranches très fines (environ 0,1 mm), puis utiliser un polissage électrolytique pour continuer à amincir le métal finit souvent par former un trou au centre de l'échantillon où les électrons peuvent traverser le métal très fin. Les métaux qui ne peuvent pas être polis électrolytiquement ou les matériaux non conducteurs ou à faible conductivité, comme le silicium, sont généralement dilués mécaniquement puis traités par frappe ionique. Pour empêcher les échantillons non conducteurs d'accumuler de l'électricité statique dans un microscope électronique à balayage, leurs surfaces doivent être recouvertes d'une couche conductrice.
Pourquoi les microscopes électroniques ont-ils une résolution plus élevée ?
Comme son nom l'indique, le microscope électronique est un microscope qui utilise des faisceaux d'électrons comme source d'éclairage. Puisque le faisceau d'électrons peut se plier sous l'action d'un champ magnétique externe ou d'un champ électrique, formant un phénomène de réfraction similaire à celui de la lumière visible traversant le verre, nous pouvons utiliser cet effet physique pour créer une « lentille » pour le faisceau d'électrons, développer un microscope électronique. La caractéristique d'un microscope électronique à transmission (TEM) est que nous utilisons des faisceaux d'électrons qui traversent l'échantillon pour imager, ce qui est différent d'un microscope électronique à balayage (Scanning Electron Microscope, SEM). Étant donné que la longueur d'onde des ondes électroniques est beaucoup plus petite que la longueur d'onde de la lumière visible (la longueur d'onde des ondes électroniques de 100 kV est de 0,0037 nm, tandis que la longueur d'onde de la lumière violette est de 400 nm), selon les données optiques. En théorie, nous pouvons nous attendre à ce que le pouvoir de résolution des microscopes électroniques soit bien meilleur que celui des microscopes optiques. En fait, la capacité de résolution des microscopes électroniques modernes a atteint 0,1 nm. Le manuel au choix de physique pour les lycéens l'explique plus en détail (petite information derrière l'effet photoélectrique)
