Plusieurs problématiques liées à l’utilisation de la microscopie à contraste de phase :
(1) Inversion de phase lorsque n'
(2) L'effet de halo et d'atténuation progressive dans le processus d'imagerie de la microscopie à contraste de phase, lorsqu'une structure devient plus sombre en raison d'un retard de phase, n'est pas une perte de lumière, mais le résultat d'une redistribution de la lumière sur le plan de l'image. Par conséquent, la lumière qui disparaît clairement dans les zones sombres apparaîtra comme un halo lumineux autour des objets plus sombres. C'est un inconvénient de la microscopie à contraste de phase, qui gêne l'observation de structures fines. Lorsque l’ouverture annulaire est très étroite, le phénomène de halo est plus marqué. Un autre phénomène de la microscopie à contraste de phase est l'effet de gradation, qui fait référence à une diminution du contraste sur les bords d'une zone plus grande avec le même retard de phase observé lors de l'observation du contraste de phase.
(3) L'influence de l'épaisseur de l'échantillon Lors de l'observation de la différence, l'épaisseur de l'échantillon doit être de 5 µm ou moins. Lorsque vous utilisez des échantillons plus épais, la couche supérieure de l'échantillon est claire, tandis que la couche plus profonde sera floue et produira des interférences de déphasage et de diffusion de la lumière.
(4) L'influence du couvre-objet et de la lame sur l'échantillon doit être recouverte d'un couvre-objet, sinon l'anneau brillant de l'ouverture annulaire et l'anneau sombre de la plaque de phase sont difficiles à chevaucher. L'observation différentielle impose également des exigences élevées en matière de qualité du verre de la lame et du verre de protection. Lorsqu'il y a des rayures, une épaisseur inégale ou des irrégularités inégales, cela peut provoquer une distorsion de l'anneau lumineux et des interférences de phase. De plus, si la lame de verre est trop épaisse ou trop fine, l’ouverture annulaire deviendra plus grande ou plus petite.
À l'heure actuelle, les microscopes optiques sont passés des microscopes biologiques traditionnels à divers types de microscopes spécialisés. Selon leurs principes d’imagerie, ils peuvent être divisés en :
① Microscope optique géométrique : y compris microscope biologique, microscope à lumière tombante, microscope inversé, microscope métallographique, microscope à champ sombre, etc.
② Microscope optique physique : y compris microscope à contraste de phase, microscope à polarisation, microscope à interférence, microscope à polarisation à contraste de phase, microscope à interférence à contraste de phase, microscope à fluorescence à contraste de phase, etc.
③ Microscopes de conversion d'informations : y compris les microscopes à fluorescence, les microspectromètres, les microscopes d'analyse d'images, les microscopes acoustiques, les microscopes photographiques, les microscopes de télévision, etc.
Énumérez plusieurs utilisations des microscopes : a Microscope biologique : De manière générale, les microscopes peuvent être divisés en stéréomicroscopes et microscopes biologiques. En raison d'objectifs et d'exigences différents, de nombreuses branches ont vu le jour, mais les principes de base restent les mêmes. La polarisation, le contraste de phase, la transmission et la chute de lumière sont toujours classés comme microscopes biologiques. Le microscope stéréoscopique, également connu sous le nom de microscope anatomique, microscope solide et stéréomicroscope, est un microscope polyvalent. Il est facile à utiliser, a de faibles exigences en matière d'échantillons, a une longue distance de travail et a un fort sentiment de tridimensionnalité lors de l'observation. Il peut être utilisé pour observer des objets physiques ou effectuer certaines opérations sur des spécimens tout en observant. Au lieu de trancher le spécimen comme un microscope biologique, le découpage nécessite une technologie et un équipement correspondants. Par conséquent, les stéréomicroscopes ont un large éventail d’applications dans des domaines tels que la microélectronique, l’assemblage et la maintenance d’instruments de précision et la microgravure. Largement utilisée en anatomie et en microchirurgie dans les domaines de la biologie et de la médecine (actuellement classées parmi les microscopes chirurgicaux), la source lumineuse utilisée en biologie et en médecine ne peut être qu'une source de lumière froide (fibre optique) ; Utilisé dans l'industrie pour l'observation, l'assemblage, l'inspection et d'autres travaux de petites pièces et de circuits intégrés. Microscope métallographique : Beaucoup de gens aiment l'écrire « microscope métallographique ». Le microscope métallographique est un microscope spécifiquement utilisé pour observer la structure métallographique d'objets opaques tels que les métaux et les minéraux. Ces objets opaques ne peuvent pas être observés dans un microscope à transmission ordinaire. La principale différence entre eux et un microscope ordinaire est que le premier utilise la lumière réfléchie, tandis que le second utilise la lumière transmise pour l'éclairage. Dans un microscope métallographique, le faisceau d'éclairage est dirigé de la lentille d'objectif vers la surface de l'objet observé, réfléchi par la surface, puis renvoyé vers la lentille d'objectif pour l'imagerie. Cette méthode d'éclairage réfléchissant est également largement utilisée dans la détection de plaquettes de silicium de circuits intégrés.
