Paramètres techniques et compétences d'utilisation du microscope à fluorescence
Paramètres techniques du microscope à fluorescence 1. Oculaire grand angle 2. Lentille d'objectif achromatique 3. Convertisseur de lentille d'objectif à quatre trous 4. Dispositif de fluorescence descendante Système d'excitation bleu (B) vert (G) 10Lampe à mercure 0W 5. Coaxial grossier mécanisme de micro-mise au point : plage de mise au point 15 mm Valeur de micro-grille 0,002 mm 6. Plage de mouvement longitudinal de l'établi mécanique à double couche : 70 mm Plage de mouvement latéral : 50 mm
Paramètres techniques du microscope à fluorescence
1. Oculaire grand angle
2. Objectif achromatique
3. Convertisseur d'objectif à quatre trous
4. Dispositif de fluorescence descendante Bleu (B) Vert (G) Système d'excitation 100W Lampe au mercure
Mécanisme de micro-mise au point grossière coaxiale : plage de mise au point : 15 mm, valeur de micro-grille : 0.002 mm
6. Établi mécanique à double couche
Plage de mouvement longitudinal : 70 mm Plage de mouvement latéral : 50 mm
Conseils et méthodes d'utilisation de la microscopie à fluorescence
（1） Diapositive
L'épaisseur de la lame doit être comprise entre 0,8 et 1,2 mm. Si la lame est trop épaisse, d'une part, elle absorbe trop de lumière, et d'autre part, elle ne peut pas provoquer l'accumulation de lumière d'excitation sur l'échantillon. La lame doit être lisse et propre, d'une épaisseur uniforme et sans fluorescence spontanée significative. Parfois, des lames de verre de quartz sont nécessaires.
（2） Verre de protection
L'épaisseur du verre de protection est d'environ 0.17 mm, et il est lisse et propre. Afin d'améliorer l'excitation, un verre de protection interférentiel peut également être utilisé. Il s'agit d'un verre de protection spécial recouvert de plusieurs couches de substances (telles que le fluorure de magnésium) qui ont des effets d'interférence différents sur différentes longueurs d'onde de lumière. Il peut permettre à la fluorescence de passer en douceur, tout en reflétant l'excitation, qui peut exciter l'échantillon.
(3) Spécimen
Les coupes de tissus ou autres spécimens ne doivent pas être trop épais. Par exemple, s'ils sont trop épais, la majeure partie de la lumière d'excitation est consommée dans la partie inférieure de l'échantillon, tandis que la partie supérieure directement observée par l'objectif n'est pas suffisamment excitée. De plus, le chevauchement des cellules ou le masquage des impuretés peuvent affecter le jugement.
（4） Agent de montage
La glycérine est couramment utilisée comme agent de montage et elle doit être exempte de fluorescence spontanée, incolore et transparente. La luminosité de la fluorescence est plus brillante à un pH de 8,5 à 9,5 et il n'est pas facile de s'estomper rapidement. Par conséquent, un mélange équivalent de glycérol et de solution tampon de carbonate 0,5 mol/l avec un pH de 9,0 à 9,5 est couramment utilisé comme agent de montage.
（5） Huile miroir
Généralement, lors de l'utilisation d'un microscope à fluorescence à fond noir et d'un microscope à huile pour observer des spécimens, il est nécessaire d'utiliser de l'huile pour lentille. Il est préférable d'utiliser une huile spéciale pour lentilles non fluorescente, qui peut également être remplacée par le glycérol susmentionné. La paraffine liquide peut également être utilisée, mais l'indice de réfraction est faible, ce qui a un léger impact sur la qualité de l'image.
