La méthode de préparation des lames de microscope
1. Méthode de frottis
La méthode de frottis est une méthode de préparation de lames en enduisant uniformément des matériaux.
Les matériaux de frottis comprennent des organismes unicellulaires-, de petites algues, du sang, des milieux de culture bactérienne, des tissus lâches d'animaux et de plantes, des testicules, des anthères, etc.
Lors du frottis, il convient de prêter attention à :
(1) La lame de verre doit être nettoyée.
(2) La lame de verre doit être plate.
(3) Le revêtement doit être uniforme. Appliquez la gouttelette au milieu à droite de la lame de verre et étalez-la uniformément avec une lame à dissection ou un cure-dent.
(4) Le revêtement doit être mince. En utilisant une autre lame de verre comme lame, poussez doucement de droite à gauche le long de la surface de la lame de verre avec le liquide appliqué (l'angle entre les deux lames doit être de 30 degrés à 45 degrés) et appliquez une fine couche uniforme.
(5) Corrigé. Si une fixation est nécessaire, des fixateurs chimiques ou des méthodes de séchage (bactéries) peuvent être utilisés pour la fixation.
(6) Coloration. Les bactéries utilisent le bleu de méthylène et le sang utilise la solution de coloration Wright. La solution de coloration doit couvrir toute la surface du revêtement.
(7) Rincer. Utilisez du papier absorbant pour absorber ou sécher.
(8) Scellez le film. Conservation à long terme grâce à un film d'arbre canadien.
2. Méthode de pressage des comprimés
La méthode de compression est une méthode qui consiste à trancher des matériaux biologiques en les plaçant entre une lame de verre et un couvercle, en appliquant une certaine pression pour disperser les cellules tissulaires.
Le processus général de la méthode de pressage des comprimés :
(1) Sélection des matériaux. Pour observer la division cellulaire, des cellules de tissus frais présentant une division cellulaire vigoureuse doivent être sélectionnées comme matériaux. Tels que l'extrémité des racines, le méristème de l'extrémité de la tige, les cellules de la moelle osseuse, les anthères (cellules mères du pollen). Nids de spermatozoïdes (spermatocytes), etc.
(2) Corrigé. La fixation du matériau peut être déterminée en fonction des besoins et l'échantillon doit être immédiatement comprimé et observé. Il n’est pas nécessaire d’effectuer un traitement de fixation séparé (synchrone avec la coloration) ; Si le matériau n'est pas inspecté immédiatement après l'échantillonnage, il peut être fixé avec un fixateur (généralement un fixateur à base d'alcool acétique). Après fixation pendant 2 à 24 heures (selon le matériau), rincer avec de l'éthanol à 95 % et conserver dans de l'éthanol à 70 % pour une utilisation ultérieure.
(3) Séparation. Les matériaux qui ne sont pas facilement dispersés par les cellules doivent être traités avec une solution de séparation par hydrolyse (telle que du HCl 1N ou du sperme d'acide chlorhydrique) pendant 6 à 20 minutes. Après dissociation, ils doivent être rincés à l’eau avant coloration.
(4) Coloration. Il existe de nombreux types de colorants. Les chromosomes sont généralement colorés avec une solution de coloration magenta à l’acide acétique.
(5) Appuyez sur la tablette. Placez le matériau sur une lame de verre, ajoutez une goutte d'eau ou de solution de colorant, couvrez la lame avec un couvercle et appuyez doucement dessus avec votre pouce.
(6) Observez. Après compression, il peut être observé au microscope.
