Il existe deux types de microscopes à fluorescence en fonction de leur trajet lumineux.
1. Microscope à fluorescence à transmission : la source de lumière d'excitation traverse le matériau de l'échantillon à travers un condenseur pour exciter la fluorescence. Un collecteur à fond sombre est couramment utilisé, ou un collecteur ordinaire peut être utilisé, et le réflecteur est ajusté pour détourner et rayonner latéralement la lumière d'excitation vers l'échantillon. Il s'agit d'un microscope à fluorescence plus ancien. L’avantage est que la fluorescence est forte à faible grossissement, mais l’inconvénient est qu’elle s’affaiblit à mesure que le grossissement augmente. Il est donc préférable d’observer des échantillons de plus grande taille.
2. Le microscope à épifluorescence est un nouveau type de microscope à fluorescence développé dans les temps modernes. La différence par rapport à ce qui précède est que la lumière d'excitation tombe de la lentille d'objectif vers la surface de l'échantillon, c'est-à-dire que la même lentille d'objectif est utilisée comme condenseur d'éclairage et comme lentille d'objectif pour collecter la fluorescence. Un séparateur de faisceau bicolore doit être ajouté au chemin optique, qui représente 45 % de l'uranium optique. Angle, la lumière d'excitation est réfléchie dans l'objectif et concentrée sur l'échantillon. La fluorescence générée par l'échantillon et la lumière d'excitation réfléchie par la surface de la lentille d'objectif et la surface du verre de protection entrent dans la lentille d'objectif en même temps et retournent au séparateur de faisceau dichromatique, de sorte que la lumière d'excitation séparée de la fluorescence, l'excitation résiduelle la lumière est ensuite absorbée par le filtre bloquant. Si vous utilisez différents inserts combinés de filtre d'excitation/séparateur de faisceau bicolore/filtre de blocage, vous pouvez répondre aux besoins de différents produits de réaction de fluorescence. L'avantage de ce type de microscope à fluorescence est que le champ de vision est uniformément éclairé, l'image est claire et plus le grossissement est grand, plus la fluorescence est forte.
(2) Comment utiliser le microscope à fluorescence.
1. Allumez la source de lumière et la lampe au mercure à ultra haute pression doit se réchauffer pendant plusieurs minutes pour atteindre son point le plus lumineux.
2. Les microscopes à fluorescence à transmission nécessitent que le filtre d'excitation requis soit installé entre la source de lumière et le condenseur, et que le filtre de blocage correspondant soit installé derrière l'objectif. Les microscopes à épi-fluorescence doivent insérer le filtre d'excitation/séparateur de faisceau bicolore/filtre de blocage requis dans la fente du chemin lumineux.
3. Utilisez un microscope à faible grossissement pour observer et ajustez le centre de la source lumineuse en fonction des dispositifs de réglage des différents modèles de microscopes à fluorescence afin qu'elle soit située au centre de l'ensemble du point d'éclairage.
4. Placez l'échantillon et ajustez la mise au point pour observer. Veuillez faire attention lors de l'utilisation : n'observez pas le filtre directement avec vos yeux pour éviter des dommages oculaires ; lorsque vous observez l'échantillon avec une lentille à huile, vous devez utiliser une lentille à huile spéciale non fluorescente ; la lampe au mercure à haute pression ne peut pas être rouverte immédiatement après avoir été éteinte. Il peut être redémarré après 5 minutes, sinon il sera instable et affectera la durée de vie de la lampe au mercure.
(3) Observer au microscope à fluorescence sur la plateforme pédagogique à l'aide d'un filtre de lumière bleu-violet. On voit que le passage est o. Dans les cellules colorées avec un colorant fluorescent orange à 01 % d'acridine, le noyau et le cytoplasme sont excités pour produire deux couleurs de fluorescence différentes (vert foncé et rouge orange).
