Trois types d'observation au microscope
I. Champ clair BF (Champ lumineux BF)
Le BF en champ clair est une méthode de microscopie familière, largement utilisée en pathologie et dans les tests d'observation de coupes colorées, et tous les microscopes sont capables de remplir cette fonction.
Champ lumineux
II. Champ sombre DF (Champ sombre DF)
Le champ sombre DF est en fait un éclairage en champ sombre. Il diffère du champ clair en ce sens qu'il n'observe pas directement la lumière éclairée, mais la lumière réfléchie ou diffractée par l'objet examiné. En conséquence, le champ de vision devient un fond sombre, tandis que l'objet examiné apparaît comme une image lumineuse.
Le principe du champ de vision sombre est basé sur le phénomène Tyndall en optique, la poussière en cas de forte lumière à travers la lumière directe, l'œil humain ne peut pas être observé, cela est dû à la forte lumière autour de la cause. Si la lumière est dirigée obliquement vers elle, les particules semblent grossir en raison de la réflexion de la lumière et devenir visibles à l’œil humain.
Un accessoire spécial requis pour l’observation en fond noir est une lunette d’observation en fond noir. Il se caractérise par le fait de ne pas laisser le faisceau lumineux traverser l'objet examiné de bas en haut, mais de modifier le trajet de la lumière de manière à ce qu'il soit dirigé obliquement vers l'objet examiné, de sorte que la lumière éclairante n'entre pas directement dans l'objet examiné. lentille d'objectif, et une image lumineuse est formée en utilisant la lumière réfléchie ou diffractée de la surface de l'objet examiné. La résolution de l'observation en champ sombre est bien supérieure à celle de l'observation en fond clair, * jusqu'à 0.02-0.004
Terrain sombre
III. Contraste de phase PH
Dans le développement de la microscopie optique, l’invention réussie du PH à contraste de phase constitue une réalisation importante de la technologie de microscopie moderne. Comme nous le savons, l'œil humain ne peut distinguer que la longueur d'onde (couleur) et l'amplitude (luminosité) des ondes lumineuses, pour les spécimens biologiques incolores et brillants, lorsque la lumière les traverse, la longueur d'onde et l'amplitude ne changent pas beaucoup, et c'est difficile pour observer le spécimen dans l'observation en champ clair.
Le microscope à contraste de phase utilise la différence de plage lumineuse de l'objet examiné pour l'examen microscopique, c'est-à-dire qu'il utilise efficacement le phénomène d'interférence de la lumière pour changer la différence de phase indiscernable de l'œil humain en différence d'amplitude distinguable, et même incolore et transparent. les substances peuvent devenir clairement visibles. Cela facilite grandement l'observation des cellules vivantes, c'est pourquoi la microscopie à contraste de phase est largement utilisée dans les microscopes inversés.
Le principe de base de la microscopie à contraste de phase est que la différence de plage optique de la lumière visible transmise à travers un échantillon est transformée en différence d'amplitude, augmentant ainsi le contraste entre diverses structures et les rendant visibles. La lumière est réfractée à travers l'échantillon et s'écarte du trajet lumineux d'origine, tout en étant retardée de 1/4λ (longueur d'onde). Si le 1/4λ est augmenté ou diminué à nouveau, la différence de plage optique devient 1/2λ, et l'interférence entre les deux faisceaux de photosynthèse est renforcée après que les axes des deux faisceaux ont été interférés, et l'amplitude augmente ou diminue, ainsi améliorer le contraste. Dans la structure, le microscope à contraste de phase présente deux caractéristiques particulières qui diffèrent du microscope optique ordinaire :
1. Le diaphragme annulaire (annulardiaphragm) est situé entre la source de lumière et le condenseur, son rôle est de faire passer la lumière à travers le condenseur pour former un cône de lumière creux, se concentrant sur l'échantillon.
2. plaque de phase (plaque de phase annulaire) dans la lentille d'objectif recouverte d'une plaque de phase en fluorure de magnésium, la lumière directe ou diffractée peut être retardée de phase 1/4λ. Il en existe deux sortes :
1. Une plaque de phase : la lumière directe retardée de 1/4 λ, deux groupes d'ondes lumineuses additionnées d'ondes lumineuses coaxiales, augmentation de l'amplitude, la structure de l'échantillon que le milieu environnant est plus lumineuse, la formation d'un contraste lumineux (ou d'un contraste négatif) .
Plaque de phase 2.B : la lumière diffractée est retardée de 1/4 λ, les deux groupes d'ondes lumineuses après la fusion de l'axe de l'onde lumineuse sont réduits, l'amplitude devient plus petite, la formation d'un contraste sombre (ou contraste positif ), la structure est plus sombre que le milieu environnant.
