Quelle est la différence entre un microscope à fluorescence et un microscope inversé ?
Le microscope est un instrument important dans la culture cellulaire et les expériences dérivées connexes. À l'heure actuelle, il existe différents types de microscopes sur le marché. C'est un défi de choisir un microscope qui répond à vos besoins et qui soit adapté. Ce qui suit présente les principes des microscopes inversés et des microscopes à fluorescence, afin que vous puissiez choisir facilement.
La composition d'un microscope inversé est la même que celle d'un microscope ordinaire et comprend principalement trois parties : une partie mécanique, une partie éclairage et une partie optique.
La composition d'un microscope inversé est la même que celle d'un microscope droit ordinaire, sauf que l'objectif et le système d'éclairage sont inversés, le premier est sous la platine et le second est au-dessus de la platine.
Cette structure permet d'augmenter considérablement la distance effective entre le système de concentration d'éclairage et la platine, ce qui est pratique pour placer des objets plus épais à observer tels que des boîtes de Pétri et des flacons de culture cellulaire (bien sûr, des lames de verre sont également acceptables). La distance de travail entre eux ne doit pas être très grande.
Le microscope inversé est utilisé pour l'observation de micro-organismes, cellules, bactéries, culture de tissus, suspensions, sédiments, etc. dans les unités médicales et sanitaires, les collèges et universités et les instituts de recherche. Il peut observer en continu le processus de reproduction et de division des cellules et des bactéries dans le milieu de culture, et peut photographier toute forme de ce processus.
Il est largement utilisé en cytologie, parasitologie, oncologie, immunologie, génie génétique, microbiologie industrielle, botanique et autres domaines.
La microscopie à fluorescence est utilisée pour étudier l'absorption, le transport, la distribution et la localisation des substances chimiques dans les cellules.
Pour l'objet à inspecter, il existe deux manières de générer la fluorescence : l'autofluorescence, qui émet de la fluorescence directement après irradiation ultraviolette ; la fluorescence secondaire, qui peut émettre une fluorescence après que l'objet à observer a été traité avec des colorants fluorescents puis irradié avec de la lumière ultraviolette.
Certaines substances présentes dans les cellules, comme la chlorophylle, produisent une autofluorescence après avoir été irradiées par des rayons ultraviolets ; certaines substances ne peuvent pas être fluorescentes par elles-mêmes, mais si elles sont colorées avec des colorants fluorescents ou des anticorps fluorescents, elles peuvent également émettre une fluorescence secondaire après avoir été irradiées par des rayons ultraviolets.
Le microscope à fluorescence utilise une source lumineuse ponctuelle à haute efficacité lumineuse et émet de la lumière d'une certaine longueur d'onde (lumière ultraviolette 365 nm ou lumière bleue violette 420 nm) à travers le système de filtre de couleur comme lumière d'excitation, après avoir excité les substances fluorescentes dans le spécimen pour émettre différentes couleurs de fluorescence, puis observer par grossissement de l'objectif et des oculaires.
Sous le fond à fort contraste, même si la fluorescence est très faible, il est facile à identifier et a une sensibilité élevée. Il est principalement utilisé pour l'étude de la structure et de la fonction cellulaire et de la composition chimique.
