Pourquoi le grossissement d'une lentille à huile est-il plus grand que celui d'un objectif ordinaire ?
Raisons pour lesquelles les bactéries doivent être fixées avant la coloration dans les expériences microbiologiques :
1 : Tuez les cellules et rendez le colorant facile à colorer.
Deuxièmement : faites en sorte que les bactéries adhèrent à la lame de verre et ne soient pas facilement éliminées par l'eau.
Lors de la fixation, séchez lentement. Si vous souhaitez vraiment accélérer le processus, vous pouvez le sécher plusieurs fois à distance au-dessus de la flamme d'une lampe à alcool. Ne séchez pas le verre pour qu'il chauffe, sinon cela pourrait détruire la forme de vie bactérienne.
Coloration de Gram et observation microscopique des bactéries
Principe expérimental
Principe de la coloration de Gram : Les différentes réactions des bactéries à la coloration de Gram sont dues à la composition et à la structure différentes de leurs parois cellulaires. La paroi cellulaire des bactéries Gram-positives est principalement un réseau de peptidoglycanes. Lorsqu'elle est traitée avec de l'éthanol, la taille des pores de la structure du réseau devient plus petite en raison de la déshydratation et la perméabilité diminue, provoquant ainsi la formation du complexe cristal violet-iode. La substance n'est pas facilement éluée et reste dans les cellules. Après décoloration et contre-coloration, la couleur bleu-violet du colorant primaire est toujours conservée. La couche de peptidoglycane de la paroi cellulaire des bactéries à Gram négatif est fine et possède une teneur élevée en lipides. Par conséquent, lors de la décoloration, les lipides sont dissous par l'éthanol (ou l'acétone) et la perméabilité de la paroi cellulaire augmente, ce qui rend le complexe cristal violet-iode relativement facile à éluer. Après contre-coloration avec contre-coloration, les cellules sont colorées avec la couleur rouge de la contre-coloration. Principe de l'imagerie au microscope : les microscopes optiques ordinaires modernes utilisent deux systèmes de lentilles, des oculaires et des lentilles d'objectif, pour agrandir les images, c'est pourquoi ils sont souvent appelés microscopes composés. Dans le système optique d’un microscope, les performances de l’objectif sont les plus critiques. La lentille à huile a le grossissement le plus important et est la plus importante pour la recherche microbiologique. L'objectif principal de l'ajout de gouttes d'huile pour lentille entre la lame et la lentille est d'augmenter la luminosité de l'éclairage et d'augmenter la résolution du microscope. L'utilisation d'huile au lieu de l'air comme moyen de propagation de la lumière réduit la réfraction ou la réflexion totale de la lumière, rendant l'image observée plus claire.
Rechercher les colonies bactériennes à observer au microscope à faible grossissement (continuer à déplacer la lame, si vous sentez une ombre rouge, arrêter immédiatement, ajuster le grossissement, si ce n'est pas une colonie, continuer à regarder), relever le barillet de l'objectif , puis passez à la lentille d'huile. Ajoutez une goutte d'huile de cèdre sur la zone d'échantillon et utilisez le dispositif de réglage grossier pour abaisser soigneusement le barillet de l'objectif afin que la lentille à huile soit immergée dans l'huile de lentille et presque en contact avec l'échantillon. Soulevez le condenseur à la position la plus haute et ouvrez l'ouverture. Utilisez le réglage grossier pour relever lentement le barillet de l'objectif jusqu'à ce que l'image de l'objet apparaisse dans le champ de vision et utilisez le réglage fin pour la rendre claire et nette.
