Ajustement du système de trajet optique d'imagerie du microscope optique et aperçu de l'examen microscopique
Ajustement du système de chemin optique d’imagerie et aperçu de l’examen microscopique
Le réglage du système optique d'imagerie d'un microscope est effectué en fonction des besoins des différentes techniques de microscopie. En résumé, la microscopie est la méthode d'éclairage utilisée lors de l'observation d'un échantillon au microscope, ainsi que la technique et la méthode permettant d'obtenir un meilleur contraste dans l'image formée par l'échantillon. Ce qui suit décrit brièvement la microscopie qui a mûri dans plusieurs méthodes et la méthode de réglage du système optique d'imagerie microscopique correspondante.
1. Champ clair de transmission :
Il s’agit de la méthode d’application la plus traditionnelle et la plus courante depuis l’invention du microscope. Composants de base : a. Objectif : n'importe quel objectif peut être utilisé pour l'observation en champ clair ; b. Longue-vue : toutes sortes de longues-vues peuvent être utilisées, de préférence équipées d'un diaphragme d'ouverture. Méthode de réglage : Une fois le système d'éclairage Kuhler du microscope ci-dessus ajusté, la méthode du champ clair peut être appliquée. Champ d'application : toutes coupes de tissus colorées, frottis sanguins, etc. Précautions : a. Lors de l'utilisation de la méthode d'observation en champ clair, le système d'éclairage Kuhler doit être ajusté ; b. Le diaphragme du champ de vision ne doit pas être ouvert arbitrairement et la lentille avant du miroir condenseur doit être placée de manière factuelle à l'extérieur et dans le chemin optique respectivement lors de l'utilisation d'objectifs de 10 ×, inférieurs à 10 × et supérieurs à 10. × ; c. Le diaphragme d'ouverture du miroir condenseur ne doit pas être utilisé pour régler la luminosité du champ de vision, et la hauteur du miroir condenseur ne doit pas être ajustée sans discernement, sinon la résolution du microscope sera abaissée et la résolution du tissu coloré sera endommagé. la résolution du microscope et les dommages ont été ajustés au système d'éclairage Kuhler ; d. pour les micrographies, à chaque changement dans l'utilisation d'un grossissement de l'objectif, il faut régler le diaphragme d'ouverture de l'objectif condenseur, de sorte que sa taille soit exactement égale à l'ouverture numérique utilisée dans l'objectif de 2/3.
2. Méthode de contraste de phase de lumière transmise :
Il s’agit d’un examen au microscope moderne d’une méthode d’amélioration du contraste. Composants de base : objectif à contraste de phase, champ de vision lumineux et lunette d'observation polyvalente à contraste de phase, télescope de mise au point, filtres verts.
Méthodes de réglage :
un. Sur la base du réglage du système d'éclairage Kuhler, focalisez clairement l'échantillon à l'aide de la méthode du champ clair
b. Tournez la lunette d'observation sur Ph1 pour aligner la position de l'échelle du cadran, choisissez un objectif à contraste de phase 10 × et remplacez l'échantillon transparent à observer.
c. Débranchez l'un des oculaires, remplacez-le par un télescope centré et faites la mise au point sur les deux anneaux de contraste de phase dans le champ de vision (l'anneau de contraste de phase noir de l'objectif et l'anneau de contraste de phase de transmission de la lumière de l'objectif condenseur).
d. Les deux anneaux de contraste de phase dans le champ de vision ne coïncident pas nécessairement, ajustez les deux dispositifs de réglage sur la lunette d'observation (réglage des positions gauche et droite du levier de réglage de l'anneau de contraste de phase et réglage des positions avant et arrière du bouton de friction) , de sorte que l'anneau de transmission de lumière pour l'avant et l'arrière à droite et à gauche coïncide avec l'anneau noir
e. Après le réglage, revenez à l'oculaire pour l'observation et appuyez sur le filtre vert dans le chemin optique pour observer l'image à contraste de phase de l'échantillon.
F. Lorsqu'il y a des objectifs 20× et 40× pour l'observation, l'objectif de repérage doit être réglé sur la position Ph2, et lors de l'utilisation de 100 objectifs, l'objectif de repérage doit être réglé sur la position Ph3.
Champ d'application : il convient à l'observation d'échantillons transparents, non colorés ou incolores, tels que toutes sortes de cellules, tissus vivants, coupes de tissus non colorées ou non colorées, organismes aquatiques, etc.
3. Méthode de contraste de phase à interférence différentielle :
Afin de surmonter la méthode d'observation par contraste de phase des détails de l'échantillon autour de l'image accompagnée d'un halo, on masquera les détails qui auraient dû être vus, ainsi que les échantillons ou les coupes de tissus nécessitent une épaisseur assez fine, en principe, peuvent être plus épais que 10 μm et d'autres limitations, l'utilisation du principe d'interférence à double faisceau pour concevoir la méthode de contraste de phase d'interférence sous-différentielle.
Méthodes de réglage :
un. La méthode DIC doit être ajustée sur la base du fait que le système Kulemin a déjà été ajusté
b. À l’aide d’un objectif 10×, déterminez la position de mise au point de l’objectif qui permet de voir clairement l’échantillon avec un champ de vision lumineux.
c. Placez le polariseur dans le chemin d'éclairage, en notant qu'il doit être orienté dans une direction est-ouest.
d. Tournez la molette du condenseur sur la position correspondant à l'utilisation de l'objectif 10 ×, c'est-à-dire DIC 0.3-0.4.
e. Insérez le curseur DIC pour l'objectif 10× à l'arrière de l'objectif ou sur le convertisseur d'objectif.
F. Insérez l’analyseur dans le chemin optique d’imagerie et notez que son orientation doit être sud-nord.
g. Remplacez l'échantillon transparent à observer, allumez la source de lumière pour focaliser clairement l'échantillon.
h. Ajustez l'insert DIC de manière à ce que l'image de contraste d'interférence différentielle obtienne le meilleur effet, c'est-à-dire l'effet de relief le plus évident.
je. En même temps, ajustez le diaphragme d'ouverture du miroir condenseur, afin que l'effet du contraste soit également optimal.
j. Affinez ensuite les détails de l’échantillon pour voir la structure de l’échantillon à différents niveaux.
k. Si la couleur complémentaire (plaque de retard rouge de premier ordre) est insérée et que l'insert DIC est ajusté en même temps, les couleurs brillantes en constante évolution peuvent être vues dans le champ de vision, avec rouge, orange, jaune, vert, bleu, violet, rose, rose-violet et jaune doré. Champ d'application : coupes de tissus transparentes ou incolorables, épaisseur jusqu'à environ 100 µm, tissus vivants et cellules vivantes en culture, petits organismes vivants, etc.
