Paramètres techniques du microscope confocal
1 résolution
La distribution de la fonction d'étalement des points du système du microscope confocal est égale à la convolution de l'objectif et à la distribution d'énergie de l'image ponctuelle. Dans le cas d'un même objectif, sa résolution latérale (plan xy) est 1,4 fois supérieure à celle des microscopes optiques traditionnels, atteignant 0.4λ/NA. Par exemple, la résolution du TcS-NT de Leica est 0.18 μm. D'après le principe du microscope confocal, nous savons que le réglage du sténopé au niveau du détecteur non seulement supprime efficacement l'interférence de l'image du point hors foyer avec l'image du plan de détection, mais supprime également l'interférence de la non-détection point sur le plan quasi-focus au point de détection, ce qui améliore considérablement la résolution de l'image. De plus, pour obtenir une résolution extrême, les systèmes de microscope confocal doivent être équipés d'une platine résistante aux vibrations.
2 Sensibilité
Les microscopes optiques traditionnels sont souvent équipés de caméras CCD pour collecter des images, mais en raison de la sensibilité relativement faible des CCD, la lumière à faible éclairement telle que la fluorescence ne peut pas être détectée, de sorte que les tubes photomultiplicateurs sont généralement utilisés comme éléments de détection dans les systèmes de microscope confocal. Bien plus que le CCD, il peut également montrer une sensibilité élevée aux signaux fluorescents faibles.
3 Résolution horizontale
Les systèmes de microscopie confocale révèlent plus de détails dans les images agrandies que la microscopie optique conventionnelle. Le grossissement mentionné ici ne fait pas référence au grossissement physique, mais fait référence aux détails morphologiques de l'image affichée par le microscope confocal dans les mêmes conditions de grossissement de l'objectif, ce qui est difficile à voir sous le microscope optique traditionnel, de sorte que l'image est plus claire et plus subtile. La résolution horizontale est plus élevée.
4 Contraste
Étant donné que la lumière d'éclairage de l'objet n'est qu'un très petit point lumineux focalisé dans le balayage et que la luminosité et le rapport signal sur bruit sont élevés, le signal lumineux est plus fort que les autres points de l'objet. Sur le plan image, le détecteur ponctuel ne peut recevoir que la lumière traversant le sténopé, tandis que la lumière parasite provenant d'autres parties de l'objet est filtrée car elle ne peut pas être focalisée sur le sténopé confocal. Il en résulte des images à contraste plus élevé d'échantillons obtenus avec des microscopes confocaux à balayage qu'avec des microscopes conventionnels.
