Méthode de comptage microbien direct

Oct 12, 2024

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Méthode de comptage microbien direct

 

1.Dilution
Diluer convenablement la suspension de levure de bière. Si la solution bactérienne n’est pas concentrée, il n’est pas nécessaire de la diluer.


2. Salle de comptage d'inspection miroir
Avant d’ajouter des échantillons, effectuez un examen microscopique de la chambre de comptage de la planche de comptage. S'il y a de la saleté, elle doit être nettoyée avant de compter.


3. Ajouter des échantillons
Couvrez la plaque de comptage de cellules sanguines propre et sèche avec un verre de protection, puis utilisez un compte-gouttes stérile à bouche fine pour déposer une petite gouttelette (pas trop) de liquide de levure de bière diluée du bord du verre de protection, permettant ainsi au liquide bactérien de s'infiltrer. entrez dans la salle de comptage par perméation capillaire le long de l'espace. Généralement, la salle de comptage peut être remplie de liquide bactérien. Faites attention à ne pas produire de bulles.


4. Comptage au microscope
Après être resté immobile pendant 5 minutes, placez la plaque de comptage de cellules sanguines sur la platine du microscope, utilisez d'abord un microscope de faible puissance pour localiser la chambre de comptage, puis passez à un microscope de haute puissance pour compter. Si la solution bactérienne s'avère trop concentrée ou trop diluée avant le comptage, la dilution doit être réajustée avant le comptage. L’exigence générale de dilution de l’échantillon est d’environ 5-10 cellules bactériennes par petite grille. Sélectionnez 5 cellules dans chaque salle de comptage (4 coins et cellules centrales en option) pour le comptage. Les cellules bactériennes situées sur la ligne du quadrillage ne sont généralement comptées que sur les lignes supérieure et droite. Lorsque la levure germe et que la taille du bourgeon atteint la moitié de la cellule mère, deux comptages bactériens sont effectués. Le comptage d'un échantillon nécessite l'obtention des valeurs de deux chambres de comptage pour calculer la teneur bactérienne de l'échantillon.


5. Nettoyer l'hémocytomètre
Après utilisation, rincez l'hémocytomètre avec une colonne d'eau sur le robinet. Ne pas laver avec des objets durs. Après le lavage, séchez à l'air libre ou séchez avec un sèche-cheveux. Examen microscopique, observez s'il y a des bactéries résiduelles ou d'autres sédiments dans chaque petite cellule. S'il n'est pas propre, il doit être lavé à plusieurs reprises jusqu'à ce qu'il soit propre.

 

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