Exigences de préparation des échantillons au microscope à fluorescence
(i) Diapositives
L'épaisseur de la lame doit être comprise entre 0,8 et 1,2 mm, des pentes trop épaisses, d'une part, une absorption plus importante de la lumière, d'autre part, ne peuvent pas rendre l'excitation de la lumière dans l'échantillon collecté. La lame doit être lisse, d’épaisseur uniforme, sans autofluorescence évidente. Il faut parfois utiliser des lames en verre de quartz.
(ii) lamelle
Les lamelles ont une épaisseur d'environ 0,17 mm et sont lisses. Afin d'améliorer la lumière d'excitation, peut également être utilisée pour interférer avec la lamelle, il s'agit d'une surface spéciale plaquée avec un certain nombre de couches de différentes longueurs d'onde de lumière qui jouent un rôle différent dans l'interférence des substances (telles que le fluorure de magnésium) de la lamelle, qui peut rendre la fluorescence à travers le lisse et refléter l'excitation de la lumière, la réflexion de l'excitation de la lumière femelle peut être l'excitation de l'échantillon.
(C) spécimens
Les coupes de tissus ou autres échantillons ne peuvent pas être trop épaisses, par exemple, une lumière d'excitation trop épaisse est principalement consommée dans la partie inférieure de l'échantillon, et la lentille d'objectif directement observée dans la partie supérieure de l'excitation insuffisante. De plus, les cellules se chevauchent ou les impuretés sont masquées, affectant le jugement.
(D) agent d'étanchéité
Agent d'étanchéité glycérol couramment utilisé, ne doit pas être autofluorescent, incolore et transparent, la luminosité de la fluorescence à pH 8,5 ~ 9,5 lorsqu'elle est plus brillante, pas facile à décolorer rapidement. Par conséquent, la glycérine et 0,5 mol/l pH9.0 ~ 9,5 du tampon carbonate sont couramment utilisés, quantité égale de mélange pour le scellant.
(E) huile de miroir
Observation générale au microscope à fluorescence sur fond noir et à l'observation d'échantillons de miroir à huile, doit utiliser de l'huile de miroir, * bonne utilisation d'une huile de miroir spéciale non fluorescente, peut également être utilisée à la place du glycérol ci-dessus, de la paraffine liquide peut également être utilisée, mais l'indice de réfraction est inférieur , la qualité de l'image est légèrement affectée.
