Comment régler l'intensité laser d'un microscope confocal à balayage laser
Il existe deux facteurs de réglage de l'intensité du laser : le bouton de contrôle de la puissance et le filtre acousto-optique accordable (AOTF).
1. Bouton de contrôle de puissance : généralement réglé à 30 % de la valeur maximale. L'augmentation de la puissance réduira la durée de vie du laser et générera du bruit laser. AOTF, PMT, etc. doivent être ajustés en premier pour obtenir la meilleure intensité.
2. Filtre accordable acousto-optique : contrôle le faisceau lumineux et l'intensité d'excitation, et peut allumer ou éteindre le laser ou l'ajuster entre 0 et 100 % en quelques millisecondes. Cela permet d'utiliser des faisceaux laser différents pour chaque point d'image et de sélectionner l'intensité requise.
Principe de fonctionnement : Il utilise l'effet de diffraction de Bragg des ondes sonores se propageant dans divers milieux sur la diffraction de Bragg incidente dans le milieu de propagation. Lorsqu'une certaine fréquence de signal RF est entrée, l'AOTF diffracte la lumière polychromatique incidente et sélectionne la lumière monochromatique avec la longueur d'onde de l'entrée. La longueur d'onde de la lumière monochromatique correspond à un-à-un à la fréquence RF f. Tant que le signal électrique est réglé, la longueur d'onde de sortie peut être modifiée rapidement et de manière aléatoire. L'AOTF réalise un réglage continu de l'intensité du laser et dispose d'une fonction de réglage rapide, réalisant une stimulation et un balayage locaux, une commutation rapide de longueur d'onde (niveau microseconde). En microscopie confocale laser, les tubes photomultiplicateurs ne peuvent pas augmenter l'intensité du laser, mais peuvent ajuster l'intensité de la lumière post-imagerie. Par conséquent, en ajustant la tension du tube photomultiplicateur, la luminosité de l’image peut être ajustée. De plus, la taille du sténopé focal affecte la quantité de photons et peut également ajuster la luminosité de l’image. Un tube photomultiplicateur est un tube à vide spécial extrêmement sensible à la lumière ultraviolette, visible et proche -infrarouge. Il peut améliorer le signal lumineux faible entrant de 108 fois, permettant de mesurer le signal lumineux.
