Spécifications optiques importantes pour la microscopie
L'ouverture numérique est un indicateur clé pour juger des performances d'un objectif (pouvoir de résolution, profondeur de champ et largeur de champ). L'ouverture numérique (NA) est calculée par la formule suivante : \\(NA.=n\\times \\sin x\\)
n=l'indice de réfraction du milieu entre l'échantillon et l'objectif ; \\(n=1\\) pour l'air, \\(n=1.515\\) pour l'huile d'immersion ; x=le demi-angle du cône lumineux formé par la lumière réfractée depuis l'axe optique jusqu'au bord de l'objectif.
En observation microscopique, si vous souhaitez augmenter la valeur NA, l'angle d'ouverture ne peut pas être augmenté. La méthode efficace consiste à augmenter l'indice de réfraction n du milieu. Sur la base de ce principe, des objectifs d'immersion dans l'eau et des objectifs d'immersion dans l'huile ont été développés. L'indice de réfraction n du milieu étant supérieur à 1, la valeur NA peut être supérieure à 1.
La valeur maximale de l'ouverture numérique est de 1,4, ce qui atteint la limite théorique et technique. Actuellement, le bromonaphtalène à indice de réfraction élevé est utilisé comme milieu d'immersion. L'indice de réfraction du bromonaphtalène est de 1,66, la valeur NA peut donc être supérieure à 1,4.
Il convient de souligner que pour faire jouer pleinement l'ouverture numérique de l'objectif, la valeur NA du condenseur doit être égale ou légèrement supérieure à la valeur NA de l'objectif lors de l'observation.
L'ouverture numérique est étroitement liée à d'autres paramètres techniques et détermine et affecte presque d'autres paramètres techniques. Elle est proportionnelle au pouvoir de résolution et au grossissement, et inversement proportionnelle à la profondeur de champ. Lorsque la valeur NA augmente, la largeur du champ et la distance de travail diminuent en conséquence.
II. Pouvoir de résolution
Le pouvoir séparateur, également appelé « résolution », est un autre paramètre technique important pour mesurer les performances d’un microscope.
La formule du pouvoir de résolution d'un microscope est exprimée comme suit : \\(d=\\lambda/NA\\)
Où d=distance minimale résolue ; \\(\\lambda\\)=longueur d'onde de la lumière ; NA.=ouverture numérique de l'objectif. On peut voir que le pouvoir de résolution de l'objectif est déterminé par deux facteurs : le NA de l'objectif et la longueur d'onde de la source lumineuse d'éclairage. Plus la valeur NA est grande et plus la longueur d'onde de la lumière d'éclairage est courte, plus la valeur d est petite et plus le pouvoir de résolution est élevé.
