Introduction aux microscopes optiques généraux
Le microscope est le principal outil d’observation des cellules. Selon les différentes sources lumineuses, ils peuvent être divisés en deux catégories : les microscopes optiques et les microscopes électroniques. Le premier utilise la lumière visible (le microscope UV utilise la lumière ultraviolette) comme source de lumière, tandis que le second utilise un faisceau d'électrons comme source de lumière. Les microscopes optiques ordinaires et les microscopes confocaux laser sont tous deux des microscopes optiques.
Les microscopes biologiques ordinaires sont composés de trois parties, à savoir : ① système d'éclairage, comprenant la source de lumière et le condenseur ; ② Système de grossissement optique, composé d'un objectif et d'un oculaire, qui constitue le corps principal du microscope. Afin d'éliminer l'aberration sphérique et l'aberration chromatique, l'oculaire et l'objectif sont composés d'un complexe composé d'un groupe de lentilles ; ③ dispositif mécanique, utilisé pour fixer les matériaux et faciliter l'observation.
La clarté d'une image obtenue au microscope dépend non seulement du grossissement, mais également de la résolution du microscope. La résolution fait référence à la capacité du microscope (ou de l'œil humain à 25 cm de la cible) à distinguer la plus petite distance entre les objets. La taille de la résolution détermine. En fonction de la longueur d'onde de la lumière, du rapport d'ouverture de la lentille et de l'indice de réfraction du milieu, la formule est exprimée comme suit :
R=0.61λ/NANA =nsin /2
Dans la formule : n=indice de réfraction du milieu ; =angle d'ouverture du miroir (l'angle d'ouverture de l'échantillon par rapport à l'ouverture de l'objectif), NA=ouverture numérique. L'angle du miroir est toujours inférieur à 180 degrés, la valeur maximale de sina/2 doit donc être inférieure à 1.
L'indice de réfraction du verre utilisé pour fabriquer des lentilles optiques est de 1,65 à 1,78. Plus l'indice de réfraction du milieu utilisé est proche de celui du verre, mieux c'est. Pour les objectifs secs, le milieu est l'air et le rapport d'ouverture de l'objectif est généralement de 0.05~0,95 ; pour les lentilles à huile, l'huile de cèdre est utilisée comme support et le rapport d'ouverture de la lentille peut être proche de 1,5.
La longueur d'onde de la lumière ordinaire est de 400~700 nm, donc la valeur de résolution du microscope ne sera pas inférieure à 0,2 μm. La résolution de l'œil humain est de 0,2 mm, de sorte que le grossissement maximum du microscope général est généralement de 1 000X.
