Principaux composants et fonctions de la microscopie confocale laser
1. Sténopé d’éclairage
Fonction : faire passer le laser à travers le sténopé d'éclairage pour former une source de lumière ponctuelle, qui présente des avantages uniques tels qu'une forte directivité, une faible divergence, une luminosité élevée, une cohérence spatiale et temporelle élevée et une excitation de polarisation planaire. Et il forme un dispositif confocal avec le sténopé du détecteur et le plan focal.
2. Séparateur de faisceau
Fonction : séparez la fluorescence d'excitation de l'échantillon des autres lumières sans signal.
3. Objectif
4. Plan focal
Fonction : La source de lumière laser se concentre sur l'objet au niveau du plan focal, excitant l'échantillon marqué par fluorescence pour émettre une fluorescence et former un point focal. Le point lumineux est traité par une série de dispositifs tels qu'un objectif et un séparateur de faisceau, et focalisé en deux endroits : le sténopé d'éclairage et le sténopé du détecteur. Le sens de confocal vient de là.
5. Sténopé du détecteur
Fonction : joue comme un filtre spatial* Pour maximiser l'obstruction de la lumière diffusée dans le plan non focalisé et de la lumière diffusée à l'extérieur du point non focal sur le plan focalisé, afin de garantir que tous les signaux de fluorescence reçus par le trou d'épingle du détecteur proviennent de la position focale de le point d'échantillonnage. Par conséquent, le point focalisé par diffraction sur l’échantillon et le point d’imagerie en trou d’épingle du détecteur contiennent les mêmes informations (conjugué à deux points).
6. Tube photomultiplicateur (détecteur)
Fonction : recevez des signaux lumineux à travers des trous d'épingle, convertissez-les en signaux électriques et transmettez-les à l'ordinateur, ce qui donne une image claire de l'ensemble du plan focal sur l'écran.
7. Laser : Le développement de la technologie de microscopie confocale ne peut être séparé du développement rapide des lasers. Nous pouvons choisir différents lasers en fonction de nos besoins de recherche. Tels que ArUV (351,364 nm), HeCd (442 nm), AR (457488514 nm), ArKr (488568647 nm), Kr (568 nm), HeNe (543 nm), HeNe (633 nm), etc.
8. Canaux de fluorescence multiples : disposer de plusieurs canaux de fluorescence pour réaliser plusieurs étiquetages d'échantillons simultanément.
