Méthode de fabrication de lames de microscope
Il existe trois méthodes de fabrication de lames de microscope :
1. Méthode de frottis
La méthode par frottis est une méthode de préparation dans laquelle le matériau est réparti uniformément sur la lame.
Les matériaux de frottis comprennent des organismes unicellulaires, de petites algues, du sang, des cultures bactériennes, des tissus lâches de plantes et d'animaux, des nids de spermatozoïdes, des anthères, etc.
Il faut faire attention lors du frottis :
(1) La lame doit être propre.
(2) La diapositive doit être maintenue à plat.
3) Le revêtement doit être uniforme. Appliquer la gouttelette de liquide d'enrobage à droite du centre de la lame et bien l'étaler avec la lame d'un couteau à dissection ou d'un cure-dent, etc.
4) Le revêtement doit être mince. Utilisez une autre lame comme poussoir, poussez doucement de droite à gauche le long de la surface de la lame avec la goutte de solution d'application (l'angle entre les deux lames doit être de 30 degrés à 45 degrés) et appliquez une couche uniformément fine.
5) Fixation. Si une fixation est nécessaire, utilisez un fixateur chimique ou une fixation par dessiccation (bactérienne).
6) Coloration. Utilisez du bleu de méthylène pour les bactéries et la coloration de Rachel pour le sang. La solution de coloration doit couvrir toute la surface enduite.
7) Rincez. Absorber sur du papier absorbant ou cuire à sec.
8) Scellez le film. Pour un stockage à long terme, utilisez une pellicule d'arbre canadienne.
2. Méthode de pressage du film
La méthode du film sous pression est le matériau biologique placé entre la lame et la feuille de couverture, en appliquant une certaine pression, les cellules tissulaires seront écartées selon une méthode de préparation.
(1) prendre du matériel. Observation de la division cellulaire, la division cellulaire doit être sélectionnée comme matériaux avec des cellules de tissus exubérantes et fraîches. Tels que les extrémités des racines, les tissus méristématiques des extrémités des tiges, les cellules de la moelle osseuse, les anthères (cellules mères du pollen). Nid de sperme (spermatogonie) et ainsi de suite.
(2) Fixations. La fixation du matériau peut être déterminée en fonction des besoins, immédiatement après avoir pris l'observation du film de pression du matériau, il est impossible d'effectuer un traitement fixe séparé (et une coloration synchrone) ; prendre le matériau n'est pas immédiatement après l'inspection, le matériau peut être fixé avec un fixateur (généralement avec un fixateur à base d'acétate d'alcool). Fixé 2 à 24 heures (selon le matériau) après lavage avec de l'éthanol à 95 %, conservé dans de l'éthanol à 70 %, en veille.
(3) Dissociation. Les cellules ne sont pas faciles à disperser le matériau avec un traitement par solution de séparation par hydrolyse (telle que 1N HCl ou acide chlorhydrique une solution alcoolique), traitement général 6 ~ 20 min, après dissociation et rinçage à l'eau avant coloration.
(4) Coloration. Il existe de nombreux types de taches. L'observation des chromosomes est couramment utilisée pour la coloration avec une solution de coloration à l'acétate de magenta.
(5) Pressage de films. Placez le matériau sur une lame, ajoutez une goutte d'eau ou de solution de coloration, couvrez la lamelle et appuyez doucement sur la lame avec votre pouce.
(6) Observations. Après pressage du film, celui-ci peut être observé au microscope.
