Pré-examen et réglage de la microscopie à fluorescence :
(1) Avant chaque observation de fluorescence, il est nécessaire de vérifier régulièrement l'alignement du filament, la mise au point du chemin optique, l'ouverture d'ouverture et les paramètres d'ouverture du champ de vision du dispositif de fluorescence.
(2) Si les composants requis du filtre d'excitation/émission de fluorescence sont installés dans le convertisseur, si l'objectif du microscope à fluorescence est configuré correctement et si les taches d'huile et la poussière devant l'objectif sont éliminées.
(3) De même, lors de l'observation de la différence de lumière transmise, il est nécessaire de vérifier la conjugaison de la lentille de focalisation au centre et de la bague de contraste à l'objectif.
(4) Vérifiez s'il y a du liquide ou de la poussière accrochée au porte-échantillon (lame de verre, verre de protection et autres récipients) et si l'épaisseur se situe dans la plage de distance de travail calibrée par l'objectif. Les échantillons tranchés ne doivent pas être trop épais, environ inférieurs ou égaux à 10 µm sont recommandés.
(5) En raison de la présence de rayons ultraviolets dans la source lumineuse, un pare-soleil marron doit être placé au-dessus de la plate-forme de chargement pour éviter les dommages causés par les UV à la rétine.
(6) Une tension instable peut réduire la durée de vie des lampes au mercure à haute tension, et un régulateur de tension doit être ajouté à l'alimentation de la source lumineuse.
(7) Pour prolonger la durée de vie de la lampe au mercure, elle ne peut être éteinte que 15 minutes après avoir été allumée ; Une fois l'alimentation fluorescente de la lampe au mercure éteinte, elle doit attendre au moins 10 minutes pour refroidir la vapeur de mercure à son état d'origine lors du redémarrage, sinon cela affectera la durée de vie de la lampe.
Observation d'images au microscope à fluorescence :
(1) Après avoir allumé la source de la lampe fluorescente pendant environ 5-10 minutes, l'intensité de l'excitation a tendance à se stabiliser et l'échantillon est chargé pour l'observation ; Pour éviter qu'une excitation excessive de la lumière pendant la focalisation et la recherche d'images ne provoque une extinction de la fluorescence de l'échantillon, l'ouverture du microscope à fluorescence est d'abord réduite ou un filtre ND est ajouté pour ajuster l'excitation à une intensité modérée, et la platine de l'échantillon est déplacée. régulièrement. Après avoir déterminé l'image miroir, elle est ajustée à l'état de fluorescence pour l'enregistrement.
(2) Ajustements avec une mauvaise qualité d’image. Les mesures d'ajustement nécessaires qui peuvent être prises, à l'exclusion des facteurs de préparation des échantillons, sont :
① Excluez les dispositifs d'ombrage ou de limitation dans le chemin optique d'imagerie, tels que les accessoires DIC, les filtres ND, etc.
② Réajustez la mise au point et l'ouverture du collecteur du microscope à fluorescence.
③ Ajustez soigneusement la bague de correction de couverture de l'objectif du microscope à fluorescence.
