Principe et fonctionnement du microscope à fond noir
① Un microscope à fond noir a un stop opaque au centre de son condenseur. Il empêche la lumière d'éclairage direct de pénétrer dans l'objectif ; seule la lumière réfléchie et diffractée par l’échantillon est collectée. En conséquence, l’arrière-plan du champ de vision apparaît sombre tandis que les bords de l’échantillon sont clairs. Ce microscope peut révéler de fines particules aussi petites que 4 à 200 nm, avec une résolution jusqu'à 50 fois supérieure à celle d'un microscope à fond clair ordinaire.
② Principe Le microscope à fond noir est modifié à partir d'un microscope optique conventionnel basé sur l'effet Tyndall. Le condenseur à fond noir bloque le faisceau central de la source lumineuse afin que la lumière ne puisse pas voyager directement vers le haut à travers l'échantillon jusqu'à l'objectif. Au lieu de cela, la lumière est détournée pour éclairer l’échantillon obliquement. L'échantillon réfléchit ou diffuse la lumière incidente, et la lumière diffusée pénètre dans l'objectif, créant un fond sombre sur tout le champ de vision.
③ Champ d'application La microscopie à fond noir est couramment utilisée pour observer des échantillons transparents non colorés. De tels spécimens ont un indice de réfraction proche de celui du milieu environnant et sont difficiles à distinguer sous un éclairage ordinaire en fond clair. L'éclairage en fond noir améliore le contraste entre l'échantillon et l'arrière-plan. Il peut détecter des particules allant jusqu’à 4 à 200 nm. Cependant, il ne montre que la présence, le mouvement et les caractéristiques de surface des objets et ne peut pas résoudre leurs fines structures internes.
④ Procédures opérationnelles
(1) Montez le condenseur de fond noir sur le support du condenseur du microscope.
(2) Utilisez une source de lumière vive. Évitez que la lumière directe ne pénètre dans l'objectif ; une lampe de microscope dédiée est généralement utilisée.
(3) Placez une goutte d'huile de cèdre entre le condenseur et la lame d'échantillon. Cela empêche une réflexion interne totale de la lumière sur la surface du condenseur, qui autrement ne parviendrait pas à éclairer l'échantillon pour l'observation sur fond noir.
(4) Soulevez ou abaissez le condenseur pour concentrer son faisceau lumineux conique sur l'échantillon. Si le condenseur est équipé de commandes de mouvement horizontal et de centrage, effectuez d’abord le centrage pour aligner précisément l’axe optique du condenseur avec celui du microscope. (5) Sélectionnez un objectif adapté au condenseur, ajustez la mise au point et affichez l'image de l'échantillon cible.
