Utilisation appropriée du microscope à fluorescence inversé
Le microscope à fluorescence inversé est un microscope multifonctionnel utilisé dans le domaine de la recherche en sciences biologiques haut de gamme. Sa structure est complexe et coûteuse. Par conséquent, pour que les étudiants diplômés en médecine comprennent correctement le fonctionnement et l'utilisation du microscope à fluorescence inversé, les enseignants doivent d'abord démontrer le fonctionnement réel du microscope à fluorescence inversé. Auparavant, un cours a été mis en place pour apprendre les connaissances de base des microscopes à fluorescence inversés, introduisant la structure, le principe, la fonction et les méthodes d'utilisation de base des microscopes à fluorescence inversés, puis dans le fonctionnement spécifique, pour différents spécimens, démontrer différentes fonctions, de peu profond à profond, progressivement Normaliser l'utilisation des microscopes à fluorescence inversés par les étudiants diplômés en médecine.
1. Utilisation correcte de l'observation en champ clair. L'une des fonctions du microscope inversé à fluorescence est l'observation en champ clair. Le principe de base est qu'une fois l'échantillon irradié par la lumière, l'absorption de la lumière de chaque partie est différente pour réaliser l'imagerie dans un fond lumineux. Il convient principalement aux cellules colorées ou colorées, à l'observation de spécimens tels que des coupes de tissus.
2. Utilisation correcte de l'observation en contraste de phase. La deuxième fonction du microscope inversé à fluorescence est l'observation en contraste de phase. Son principe de base est de convertir la différence de chemin optique de différentes parties de l'échantillon en différence d'amplitude. L'observation est réalisée à travers une lentille d'objectif à contraste de phase avec une plaque de phase et une lentille de condenseur avec un diaphragme annulaire. Il s'applique principalement à Pour l'observation de cellules vivantes ou de coupes de tissus non colorées, dans le processus d'enseignement expérimental, en plus de guider correctement les étudiants diplômés en médecine pour observer les méthodes de fonctionnement de base de l'observation par contraste de phase, il est plus important de les guider vers comprendre et maîtriser les spécimens utilisés pour l'observation en contraste de phase. Pour eux, l'observation microscopique des cellules en culture est la plus couramment utilisée dans les futures recherches scientifiques. Tout d'abord, pour le choix du matériel de la cellule, il est généralement recommandé d'utiliser des boîtes de culture en verre et en plastique, des plaques de culture et des flacons de culture. La plupart d'entre eux sont incolores et transparents et peuvent être observés directement sur un microscope à fluorescence inversé sans verser le liquide cellulaire et d'autres traitements. Deuxièmement, lors de l'observation microscopique, ne pas ouvrir le couvercle de l'équipement à volonté, afin de ne pas contaminer les cellules. Enfin, pour les opérateurs, ils doivent porter des gants, des masques et des blouses blanches, qui peuvent non seulement protéger leur propre santé mais aussi prévenir la contamination cellulaire.
3. Utilisation correcte de l'observation par fluorescence. La troisième fonction du microscope inversé à fluorescence est l'observation de la fluorescence. Le principe de base est d'utiliser une lumière d'excitation pour exciter l'échantillon afin de générer une fluorescence, de manière à réaliser l'observation de la forme et de la position de l'échantillon. Il convient principalement à l'observation d'échantillons marqués par fluorescence. L'observation de la fluorescence est une fonction importante d'un microscope à fluorescence inversé, et ses accessoires sont coûteux et spéciaux à utiliser. Pour que les étudiants diplômés en médecine appréhendent correctement le fonctionnement et l'utilisation de l'observation de la fluorescence, les enseignants doivent non seulement leur enseigner les méthodes de fonctionnement de base, mais surtout, leur apprendre à maîtriser sa particularité. Tout d'abord, lors de la préparation des échantillons, la lamelle et la lamelle doivent avoir une surface lisse et une épaisseur appropriée (la lamelle doit mesurer entre 0.8 mm et 1,2 mm, et la lamelle doit être d'environ { {5}}.17 mm ); l'échantillon doit avoir une épaisseur appropriée et éviter que les cellules ne se chevauchent ou ne soient masquées par des impuretés ; le milieu de montage doit utiliser un mélange à volume égal de glycérol et de tampon carbonate (0.5mol/L pH9.0-9.5). Deuxièmement, avant l'observation fluorescente, la lumière électrique dans la pièce et la lumière blanche du microscope à fluorescence inversé doivent être éteintes pour assurer l'environnement dans une pièce sombre. Enfin, dans l'observation de la fluorescence, le temps d'observation doit être strictement contrôlé, généralement 1-2 heures/temps est approprié, sinon la fluorescence s'atténuera et disparaîtra ; lors du réglage de la source lumineuse, portez des lunettes de protection pour éviter d'endommager les lunettes par les rayons ultraviolets.
4. Utilisation correcte de la capture d'image. Dans la recherche scientifique, il est non seulement nécessaire que le microscope à fluorescence inversé puisse réaliser diverses observations, mais il faut également que le microscope à fluorescence inversé puisse réaliser la capture d'image. Le système de microscope à fluorescence inversé combine un microscope optique avec un ordinateur par conversion photoélectrique, non seulement pour l'observation microscopique sur l'oculaire, mais également pour l'observation, l'édition et l'enregistrement dynamiques d'images en temps réel sur l'ordinateur.
