Il existe deux types de microscopes à fluorescence selon leur chemin optique :
1. Microscope à fluorescence à transmission : la source de lumière d'excitation passe par le miroir du condenseur à travers le matériau de l'échantillon pour stimuler la fluorescence. Collecteur de champ sombre couramment utilisé, peut également être utilisé comme collecteur ordinaire, ajustez le réflecteur de manière à ce que la lumière d'excitation soit transmise et contournée vers l'échantillon. Il s’agit du type le plus ancien de microscope à fluorescence. L'avantage est que la fluorescence est forte à faible grossissement, et l'inconvénient est qu'elle s'affaiblit avec l'augmentation du grossissement. Il est donc préférable d’observer les spécimens les plus gros.
2. Microscope à fluorescence de type descendant. Il s'agit d'un nouveau type de microscope à fluorescence développé ces derniers temps. La différence réside dans le fait que l'excitation de la lumière depuis la lentille d'objectif jusqu'à la surface de l'échantillon, c'est-à-dire la même lentille d'objectif que l'éclairage du concentrateur et la collecte de l'objectif de fluorescence. Le chemin optique doit être ajouté à un séparateur de faisceau bicolore, qui est de 45. Angle avec la lumière uranium, la lumière d'excitation est réfléchie dans la lentille de l'objectif et recueillie dans l'échantillon, la fluorescence produite par l'échantillon et l'objectif Surface de la lentille de la lentille, surface du verre de protection réfléchissant la lumière d'excitation dans la lentille de l'objectif en même temps, et retour au séparateur de faisceau bicolore, de sorte que la lumière d'excitation et la fluorescence soient séparées de la lumière d'excitation résiduelle et soient ensuite absorbées par les filtres bloquants. Si vous changez les différents blocs combinés de filtre d'excitation/séparateur de faisceau bicolore/filtre de blocage, vous pouvez répondre aux besoins de différents produits de réaction de fluorescence. Les avantages de ce microscope à fluorescence sont le champ de vision d'un éclairage uniforme, une imagerie claire, plus le grossissement de la fluorescence est grand, plus il est fort.
(B) méthode de microscope à fluorescence.
1. Ouvrez la source lumineuse, la lampe au mercure ultra haute pression pour préchauffer pendant quelques minutes pour atteindre le point le plus lumineux.
2. Le microscope à fluorescence à transmission doit être installé entre la source de lumière et le concentrateur requis pour stimuler le filtre, à l'arrière de l'objectif avec le filtre de blocage correspondant. Le microscope à fluorescence descendante doit être inséré dans la fente du chemin optique du filtre d'excitation requis/séparateur de faisceau bicolore/inserts de filtre de blocage.
3. Observez avec une lentille à faible grossissement et ajustez le centre de la source lumineuse de sorte qu'elle soit située au centre de l'ensemble du point d'éclairage selon le dispositif de réglage des différents modèles de microscopes à fluorescence.
4. Placez la tranche d'échantillon, la mise au point peut être observée. L'utilisation doit faire attention à : la fin de l'installation des filtres, ne pas utiliser les yeux pour observer directement, afin de ne pas causer de dommages aux yeux ; avec un miroir à huile pour observer l'échantillon, vous devez utiliser un miroir à huile spécial non fluorescent ; La lampe au mercure à haute pression ne peut pas être rouverte immédiatement après la fermeture de la lampe, vous devez attendre 5 minutes avant de pouvoir recommencer, sinon elle sera instable, affectant la durée de vie de la lampe au mercure.
(C) observation Au microscope à fluorescence sur la scène d'enseignement avec un filtre de lumière bleu-violet, les cellules colorées avec 0,01 % de colorant fluorescent orange d'amidine peuvent être vues, et le noyau et le cytoplasme des cellules sont excités pour produire deux types différents. couleurs de fluorescence (vert foncé et rouge orangé).
