À quoi sert un microscope à fluorescence
Les microscopes à fluorescence utilisés pour des applications de recherche fonctionnent sur la base d'un ensemble de filtres optiques :
Un filtre d'excitation
un séparateur de faisceau
un filtre d'émission
Ces filtres sont généralement insérés ensemble dans un bloc filtrant (microscopes composés) ou dans un réceptacle plat (principalement stéréomicroscopes).
Le filtre d'excitation sélectionnera la longueur d'onde pour exciter un colorant particulier dans l'échantillon, et le filtre d'émission agit comme un contrôle de qualité, ne laissant passer que la longueur d'onde émise par un fluorophore particulier. Les filtres dichroïques sont utilisés pour réfléchir la lumière dans la bande d'excitation et laisser passer la lumière dans la bande d'émission afin de produire une lumière incidente de fluorescence classique.
La fluorescence est l’un des phénomènes physiques les plus couramment utilisés en microscopie biologique et analytique, principalement en raison de sa grande sensibilité et spécificité. La fluorescence est une forme de luminescence froide.
La microscopie à fluorescence permet même à l'utilisateur de déterminer la distribution et le nombre d'espèces moléculaires individuelles ainsi que leur emplacement dans la cellule. L'étude de la co-régionalisation et des interactions, des concentrations en ions ainsi que l'observation des processus de cytose et de cytotoxicité entre cellules peuvent être réalisées.
Grâce à la microscopie à fluorescence à super-résolution, même les structures de sous-résolution peuvent être visualisées.
