Qu'est-ce qu'un microscope à contraste de phase
Un microscope à contraste de phase est un microscope qui peut convertir la différence de phase (ou différence de trajet optique) générée lorsque la lumière traverse un objet en un changement d'amplitude (intensité lumineuse). Principalement utilisé pour observer des cellules vivantes, des coupes de tissus non colorées ou des échantillons colorés manquant de contraste.
L’œil humain ne peut distinguer que les changements de longueur d’onde (couleur) et d’amplitude de la lumière visible, mais ne peut pas distinguer les changements de phase. La plupart des spécimens biologiques sont hautement transparents et l'amplitude des ondes lumineuses reste pratiquement inchangée après leur passage, avec seulement des changements de phase.
Le microscope à contraste de phase convertit essentiellement la différence de chemin optique de la lumière visible traversant l'échantillon en différence d'amplitude, améliorant ainsi le contraste entre diverses structures et les rendant claires et visibles. La lumière se réfracte à travers l'échantillon, s'écartant du trajet lumineux d'origine et étant retardée de 1/4 λ (longueur d'onde), si elle est encore augmentée ou diminuée de 1/4 λ, la différence de trajet optique devient alors 1/2 λ, l'interférence entre les deux axes photosynthétiques sont renforcés et l'amplitude augmente ou diminue, augmentant le contraste.
D'un point de vue structurel, la différence entre la microscopie à contraste de phase et la microscopie optique ordinaire réside dans :
1. Ouverture annulaire Diaphragme à ouverture circulaire, installé entre la source lumineuse et le condenseur, pour former un cône creux de lumière traversant le condenseur et le focalisant sur l'échantillon.
2. Le microscope à différence de phase a ajouté une plaque de phase recouverte de fluorure de magnésium à l'intérieur de l'objectif pour retarder la phase de la lumière directe ou diffractée de 1/4 λ. Il y a deux zones sur la plaque de phase, la partie où passe la lumière directe est appelée « surface conjuguée » et la partie où passe la lumière diffractée est appelée « surface de compensation ». Le panneau de phase est divisé en deux types selon son effet de fonctionnement :
(1) Une carte de phase positive : retarde la lumière directe de 1/4 λ. Après la combinaison de deux ensembles d'ondes lumineuses, l'amplitude des ondes lumineuses augmente et la structure de l'échantillon devient plus lumineuse que le milieu environnant, formant un contraste brillant. (également connu sous le nom de contraste négatif).
(2) Plaque de phase B plus : retarde la lumière de diffraction de 1/4 λ. Après la fusion des deux ensembles de rayons lumineux, les ondes lumineuses se soustraient et l'amplitude diminue, ce qui entraîne une structure d'échantillon plus sombre que le milieu environnant, formant un contraste sombre. (également connu sous le nom de contraste positif). Un objectif doté d'une plaque de phase est appelé objectif à contraste de phase et le mot « Ph » est souvent utilisé sur la coque extérieure de l'objectif.
