Qu’est-ce que la microscopie à fond noir ? Quelle est la taille d’une cellule ?
Le microscope à champ sombre est un type de microscope optique, également appelé ultramicroscope. Il y a un écran lumineux au centre du condenseur d'un microscope à fond noir afin que la lumière d'éclairage ne pénètre pas directement dans la lentille humaine. Seule la lumière réfléchie et diffractée par l’échantillon peut pénétrer dans l’objectif. Par conséquent, l’arrière-plan du champ de vision est noir et les bords des objets sont clairs. de. Ce type de microscope peut voir des particules aussi petites que 4 ~ 200 nm et la résolution peut être 50 fois supérieure à celle des microscopes ordinaires.
principe
Le microscope à champ sombre est modifié sur la base de la structure du microscope optique ordinaire en utilisant le principe de l'effet optique Tyndall. Les condenseurs Darkfield permettent de bloquer le faisceau central de la source lumineuse. Il n'est pas possible de pénétrer dans l'objectif à travers l'échantillon de bas en haut. En conséquence, la lumière change de trajectoire et irradie obliquement sur l’échantillon observé. Le spécimen est réfléchi ou dispersé lorsqu’il rencontre la lumière. La lumière diffusée est projetée dans l'objectif, de sorte que tout le champ de vision est sombre.
Le principe de base de la microscopie en fond noir est l’effet Tyndall. Lorsqu'un faisceau de lumière traverse une pièce sombre, un « chemin » de poussière brillant peut être observé dans l'air depuis la direction perpendiculaire à la lumière incidente. Ce phénomène est l'effet Tyndall. Après le remplacement d'un microscope à fond noir par un condenseur à fond noir sur un microscope optique ordinaire, en raison de l'occlusion de la structure parabolique interne du condenseur, la lumière irradiant sur la surface de l'objet à inspecter ne peut pas entrer directement dans l'objectif. lentille et oculaire, et seule la lumière diffusée peut passer à travers, réduisant ainsi le champ de vision. est sombre. Étant donné que le microscope à champ sombre n'émet pas de lumière transparente dans le système d'observation directe, lorsqu'il n'y a aucun objet, le champ de vision est sombre et il est impossible d'observer un objet ; lorsqu'il y a un objet, la lumière diffractée par l'objet et la lumière diffusée sont clairement visibles sur le fond sombre. . Lors de l’observation d’un objet dans un champ sombre, la majeure partie de la lumière d’éclairage est réfractée. En raison de l'emplacement, de la structure et de l'épaisseur de l'objet (spécimen), la diffusion et la réfraction de la lumière varient considérablement.
Structure et modifications
La structure de base d'un microscope à fond sombre est un ensemble optique de microscope ordinaire plus une barrière lumineuse. Un microscope ordinaire peut être converti en microscope à fond noir à condition que le condenseur soit amovible et que le diamètre du support soit adapté à l'installation d'un condenseur à fond noir. Lorsqu'il n'y a pas de condenseur de champ sombre, vous pouvez utiliser du papier noir épais pour créer un écran central de lumière et le placer sur le cadre du filtre sous le condenseur d'un microscope ordinaire pour obtenir l'effet de champ sombre. Le pare-lumière est utilisé pour bloquer la lumière au milieu de la source lumineuse afin que la lumière ne puisse pénétrer dans l'échantillon que depuis l'environnement. La taille est à peu près la même que la taille de l'ouverture. Différents grossissements utilisent différentes ouvertures, il faut donc créer différents blocs de lumière.
Application pratique
La microscopie en fond noir est souvent utilisée pour observer des échantillons transparents non colorés. Étant donné que ces échantillons ont un indice de réfraction similaire à celui de l’environnement, ils sont difficiles à voir clairement dans des conditions ordinaires de champ clair. Par conséquent, les conditions de champ sombre sont utilisées pour améliorer le contraste entre l’échantillon lui-même et l’arrière-plan. Ce type de microscope peut voir des particules aussi petites que 4 à 200 nm. Il ne peut voir que l'existence, le mouvement et les caractéristiques de la surface de l'objet, mais ne peut pas distinguer la structure fine de l'objet. Cliniquement, la microscopie à fond noir est couramment utilisée pour examiner les spirochètes pâles. Il s'agit d'un test d'agent pathogène qui revêt une grande importance pour le diagnostic de la syphilis précoce.
