Trucs et astuces pour le microscope à fluorescence
(i) Diapositives
L'épaisseur de la lame doit être comprise entre 0,8 et 1,2 mm, des pentes trop épaisses, d'une part, une absorption plus importante de la lumière, d'autre part, ne peuvent pas rendre l'excitation de la lumière dans l'échantillon collecté. La lame doit être lisse, d’épaisseur uniforme, sans autofluorescence évidente. Parfois, des lames en verre de quartz sont nécessaires.
(ii) Lamelles
Épaisseur de la lamelle d'environ 0,17 mm, propre. Afin d'améliorer la lumière d'excitation, peut également être utilisée pour interférer avec la lamelle, qui est une surface spéciale plaquée avec un certain nombre de couches de différentes longueurs d'onde de lumière qui jouent un rôle différent dans l'interférence de substances (telles que le fluorure de magnésium) de la lamelle, qui peut produire la fluorescence grâce à l'excitation douce et réfléchissante de la lumière, l'excitation réfléchie de la lumière peut être l'excitation de la femme spécimen.
(iii) spécimens
Les coupes de tissus ou autres échantillons ne peuvent pas être trop épaisses, par exemple, une lumière d'excitation trop épaisse est principalement consommée dans la partie inférieure de l'échantillon, et la lentille d'objectif directement observée dans la partie supérieure de l'excitation insuffisante. De plus, le chevauchement des cellules ou le masquage des impuretés affectent le jugement.
(D) agent d'étanchéité
Agent d'étanchéité glycérol couramment utilisé, doit être exempt d'autofluorescence, incolore et transparent, la luminosité de la fluorescence à pH 8,5 ~ 9,5 est plus brillante, pas facile à disparaître rapidement. Par conséquent, la glycérine et 0,5mol/lpH9.0 ~ 9,5 de tampon carbonate sont couramment utilisés, quantité égale de mélange pour agent d'étanchéité.
(E) huile de miroir
L'observation générale d'échantillons au microscope à fluorescence sur fond noir et à l'huile miroir doit utiliser de l'huile miroir, de préférence en utilisant une huile miroir spéciale non fluorescente, peut également être utilisée à la place du glycérol mentionné ci-dessus, de la paraffine liquide peut également être utilisée, mais l'indice de réfraction du bas, affectant légèrement la qualité de l’image.
